Chapitre II
Matériel et méthodes
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II.4.2. Préparation des otolithes
La préparation à l’observation des otolithes peut se faire avec différentes techniques, la lecture
directe sur des otolithes entiers est celle retenue pour les jeunes et moyens poissons. Cependant
pour les pièces plus grandes on a eu recourt à un polissage de la face concave avec du papier verre
0,5 mm, puis immersion dans l’EDTA (Ethylenediamine tetraacetic acide) un acide léger pour la
décalcification des otolithes. À l’origine le protocole est décrit par Tardif (2011) stipulé une
coloration au bleu de toluidine 0,01% après avoir laissé agir une goutte d’EDTA pendent 3 min et
rincé à l’eau déminéralisée.
Il est recommandé d’utiliser des milieux éclaircissant durant l’observation des otolithes. Un
mélange d’alcool à 70% et de glycérine à 30% permettra aussi d’éliminer les reflets.
II.4.3. Système d’observation et de mensuration
Nous avons utilisé la technique d’observation assistée par ordinateur, cette technique a récemment
conquis les domaines de la biologie. Le système d’observation est constitué de trois unités :
Unité d’aquisition d’images constituée par une loupe binoculaire sur laquelle s’adapte une
caméra de type Oxyrian. L'acquisition en lumière réfléchie se réalise en posant la face convexe
de l'otolithe contre le fond noire de la loupe.
Unité centrale de traitement, de stockage et de visualisation composée d’un ordinateur pour la
présentation de la pièce calcifiée, le stockage des paramètres biologiques ou analyse de l'image.
Unité logicielle : Future WinJoe
TM
pour l’aquisition numérique des images, TSView utilisé pour
les mensurations numériques des otolithes sur écran (Fig-II.2), Microsoft Excel pour la saisie
et archivage des données.
Figure II. 2 : Mesures morphométriques effectuées sur l’otolithe.
Matériel et méthodes
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II.4.2. Préparation des otolithes
La préparation à l’observation des otolithes peut se faire avec différentes techniques, la lecture
directe sur des otolithes entiers est celle retenue pour les jeunes et moyens poissons. Cependant
pour les pièces plus grandes on a eu recourt à un polissage de la face concave avec du papier verre
0,5 mm, puis immersion dans l’EDTA (Ethylenediamine tetraacetic acide) un acide léger pour la
décalcification des otolithes. À l’origine le protocole est décrit par Tardif (2011) stipulé une
coloration au bleu de toluidine 0,01% après avoir laissé agir une goutte d’EDTA pendent 3 min et
rincé à l’eau déminéralisée.
Il est recommandé d’utiliser des milieux éclaircissant durant l’observation des otolithes. Un
mélange d’alcool à 70% et de glycérine à 30% permettra aussi d’éliminer les reflets.
II.4.3. Système d’observation et de mensuration
Nous avons utilisé la technique d’observation assistée par ordinateur, cette technique a récemment
conquis les domaines de la biologie. Le système d’observation est constitué de trois unités :
Unité d’aquisition d’images constituée par une loupe binoculaire sur laquelle s’adapte une
caméra de type Oxyrian. L'acquisition en lumière réfléchie se réalise en posant la face convexe
de l'otolithe contre le fond noire de la loupe.
Unité centrale de traitement, de stockage et de visualisation composée d’un ordinateur pour la
présentation de la pièce calcifiée, le stockage des paramètres biologiques ou analyse de l'image.
Unité logicielle : Future WinJoe
TM
pour l’aquisition numérique des images, TSView utilisé pour
les mensurations numériques des otolithes sur écran (Fig-II.2), Microsoft Excel pour la saisie
et archivage des données.
Figure II. 2 : Mesures morphométriques effectuées sur l’otolithe.