Chapitre II : Matériels et Méthodes
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Et juste apres les faire sortir du bain marie on les met toute de suite sous le robinet pour subir
un chock thermique graçe à une eau froide quelque instant. Apres on ajoute le milieu qui a été
préparé ( gélose VF ) , en remplirant les tubes pas completement , Incubation à 37°C pendant
18 h.
Lecture : halo noir autour des colonies = présence de germes sulfito réducteurs
C 3 . Recherche des Staphylococcus aureus
Tous les staphylocoques présents dans les aliments ne sont pas entérotoxinogènes. Ce n’est
que depuis peu que l’on admet le rôle de S. aureus comme germe indicateur de contamination
humaine (animale ou originelle) dans les aliments (aliments crus en particulier).
Cette notion permet donc d’accepter des staphylocoques en petit nombre dans les aliments.
Ces germes sont naturellement présents sur la peau et les muqueuses de l’homme et des
animaux avec des charges qui peuvent largement dépasser les 100 000 germes par cm
2 .
L’identification de S.aureus repose surtout sur la recherche de l’activité coagulase et ADNase
(thermonucléase) et sur la recherche de protéines à activités particulières.
- Parmi les coques Gram+, catalase+, seuls les Staphylococcus aureus possèdent un
plasma coagulase (coagulation de plasma oxalaté de lapin en moins de 24 h). La
production de coagulase permet de différencier S. aureus de S. epidermidis et des
Micrococcus.
- La thermonucléase est recherchée par cette méthode après traitement de l’inoculum à
100°C pendant 15 minutes et dépôt de 5 à 10 µl d’inoculum dans des puits creusés à
l’emporte-pièce. Après 4 h d’incubation à 37°C, la gélose ADN préalablement
additionnée de 3 ml de bleu de toluidine 0,1 M par litre devient rose autour des puits
contenant la thermonucléase
Les souches de Staphylococcus pathogènes coagulent en général le plasma de lapin et les
staphylocoques coagulase négative ne produisent qu’exceptionnellement des entérotoxines.
La présence d’une ADNase thermostable semble être en bonne corrélation avec le pouvoir
entérotoxinogène des germes.
Le mode opératoire est le suivant :
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Et juste apres les faire sortir du bain marie on les met toute de suite sous le robinet pour subir
un chock thermique graçe à une eau froide quelque instant. Apres on ajoute le milieu qui a été
préparé ( gélose VF ) , en remplirant les tubes pas completement , Incubation à 37°C pendant
18 h.
Lecture : halo noir autour des colonies = présence de germes sulfito réducteurs
C 3 . Recherche des Staphylococcus aureus
Tous les staphylocoques présents dans les aliments ne sont pas entérotoxinogènes. Ce n’est
que depuis peu que l’on admet le rôle de S. aureus comme germe indicateur de contamination
humaine (animale ou originelle) dans les aliments (aliments crus en particulier).
Cette notion permet donc d’accepter des staphylocoques en petit nombre dans les aliments.
Ces germes sont naturellement présents sur la peau et les muqueuses de l’homme et des
animaux avec des charges qui peuvent largement dépasser les 100 000 germes par cm
2 .
L’identification de S.aureus repose surtout sur la recherche de l’activité coagulase et ADNase
(thermonucléase) et sur la recherche de protéines à activités particulières.
- Parmi les coques Gram+, catalase+, seuls les Staphylococcus aureus possèdent un
plasma coagulase (coagulation de plasma oxalaté de lapin en moins de 24 h). La
production de coagulase permet de différencier S. aureus de S. epidermidis et des
Micrococcus.
- La thermonucléase est recherchée par cette méthode après traitement de l’inoculum à
100°C pendant 15 minutes et dépôt de 5 à 10 µl d’inoculum dans des puits creusés à
l’emporte-pièce. Après 4 h d’incubation à 37°C, la gélose ADN préalablement
additionnée de 3 ml de bleu de toluidine 0,1 M par litre devient rose autour des puits
contenant la thermonucléase
Les souches de Staphylococcus pathogènes coagulent en général le plasma de lapin et les
staphylocoques coagulase négative ne produisent qu’exceptionnellement des entérotoxines.
La présence d’une ADNase thermostable semble être en bonne corrélation avec le pouvoir
entérotoxinogène des germes.
Le mode opératoire est le suivant :