Chapitre II : Matériel et méthodes
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Lecture et dénombrement
La lecture se fait sur 2 boites ensemencées avec des dilutions successives. Le nombre de
germes par gramme (N) de produit est obtenu selon la formule suivante :
N= nombre de germes par gramme de produit
ΣC= somme des colonies caractéristiques sur les deux boites retenues
V= volume de l’inoculum appliqué à chaque boite (en ml)
d= taux de dilution correspondant à la première dilution retenue
n1= nombre de boite lu à la 1e dilution
n2= nombre de boite lu à la 2
ème dilution.
II.4.4. Recherche et dénombrement des coliformes
Le terme "coliformes fécaux" ou "coliformes thermo-tolérants" renferme toutes les espèces
bactériennes faisant partie de la famille des Enterobacteriaceae qui sont aérobies ou
anaérobies facultatives, à Gram négatif, asporulées, en forme de bâtonnet. L'espèce
caractéristique et principale des coliformes fécaux est Escherichia coli, mais d'autres souches
de coliformes, telles Citrobacter sp, Enterobacter sp et Klebsiella sp, peuvent aussi se
reproduire dans un milieu lactosé à 44,5°C. Les coliformes fécaux sont des micro-organismes
indicateurs d'une pollution d'origine fécale humaine ou animale. Ils sont généralement en
nombre inférieur aux coliformes totaux et indiquent qu'il y a contamination récente ou
constante.
Mode opératoire
Leur culture se fait en profondeur, à l’aide d’une pipette pasteur, on met 20 goutte d’une
dilution sur la boite de pétrie, on coule la gélose désoxycholate à 0.1% puis on procède a
l’étalement en faisant des mouvements de huit.
Une série de boite sera incuber à 37°C pendant 24h à 48h et servira à la recherche des
coliformes totaux, et celle qui servira à la recherche des coliformes fécaux, sera incuber à
44°C pendant 24h à 48h.
Lecture et dénombrement
Pour les deux séries la première lecture se fait au bout de 24h et consiste à repérer des petites
colonies de couleur rouge fluorescente sous lampe UV.
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Lecture et dénombrement
La lecture se fait sur 2 boites ensemencées avec des dilutions successives. Le nombre de
germes par gramme (N) de produit est obtenu selon la formule suivante :
N= nombre de germes par gramme de produit
ΣC= somme des colonies caractéristiques sur les deux boites retenues
V= volume de l’inoculum appliqué à chaque boite (en ml)
d= taux de dilution correspondant à la première dilution retenue
n1= nombre de boite lu à la 1e dilution
n2= nombre de boite lu à la 2
ème dilution.
II.4.4. Recherche et dénombrement des coliformes
Le terme "coliformes fécaux" ou "coliformes thermo-tolérants" renferme toutes les espèces
bactériennes faisant partie de la famille des Enterobacteriaceae qui sont aérobies ou
anaérobies facultatives, à Gram négatif, asporulées, en forme de bâtonnet. L'espèce
caractéristique et principale des coliformes fécaux est Escherichia coli, mais d'autres souches
de coliformes, telles Citrobacter sp, Enterobacter sp et Klebsiella sp, peuvent aussi se
reproduire dans un milieu lactosé à 44,5°C. Les coliformes fécaux sont des micro-organismes
indicateurs d'une pollution d'origine fécale humaine ou animale. Ils sont généralement en
nombre inférieur aux coliformes totaux et indiquent qu'il y a contamination récente ou
constante.
Mode opératoire
Leur culture se fait en profondeur, à l’aide d’une pipette pasteur, on met 20 goutte d’une
dilution sur la boite de pétrie, on coule la gélose désoxycholate à 0.1% puis on procède a
l’étalement en faisant des mouvements de huit.
Une série de boite sera incuber à 37°C pendant 24h à 48h et servira à la recherche des
coliformes totaux, et celle qui servira à la recherche des coliformes fécaux, sera incuber à
44°C pendant 24h à 48h.
Lecture et dénombrement
Pour les deux séries la première lecture se fait au bout de 24h et consiste à repérer des petites
colonies de couleur rouge fluorescente sous lampe UV.