Chapitre III
Matériel et Méthodes
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III.7.3. Purification
Le solvant organique utilisé piège non seulement les hydrocarbures mais aussi tous les
composés organiques polaires tels que les lipides et les acides gras. Afin d'éliminer ces
derniers et d'isoler les hydrocarbures, une purification est réalisée par le biais d'une
chromatographie d'adsorption sur colonne ouverte.
La phase stationnaire se traduit par une colonne en verre de 50 ml de volume avec un
diamètre interne de 10 mm contenant la laine de verre à l’extrémité inférieure, 5g de Florisil
conditionné et une pincée du sulfate de sodium à l’extrémité supérieure. L'élution est
effectuée avec 20 ml d'hexane. L'éluât récupéré a un volume final de 20 ml.
III.7.4. Purification et fractionnement
Cette méthode utilise la chromatographie sur colonne ouverte moyennement, contenant de
l’alumine neutre (pouvoir de purification) et du gel de silice (pouvoir séparateur et/ou rôle de
fractionnement) conditionnés. Ces deux composés sont agencés en deux lits successifs de 5g :
 L’alumine, est située dans la partie supérieure de la colonne.
 Le gel de silice au-dessous.
L’extrémité supérieure contient du sulfate de sodium tandis que l’extrémité inférieure de la
colonne est occupée par de la laine de verre. Une élution est réalisée avec un mélange de 20
ml d’hexane et de dichlorométhane dans les proportions 70 :30 (fraction aromatique)
(FigureIII.10).
FigureIII.10: Purification et fractionnement par chromatographie sur colonne ouverte (in
Boughrira, 2012)