Partie II
Matériel et méthodes
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o La température est équilibrée par un thermostat réglé à 20°C.
o Les échantillons sont incubés en obscurité pendant cinq jours.
o Lecture des résultats et multiplication par un coefficient (en relation avec
le volume incubé).
2.4.5 Dosage des sels nutritifs
2.4.5.1 Principe de dosage des sels nutritifs dans l’eau
La méthode utilisée pour le dosage des sels nutritifs (ammonium, nitrites, nitrates,
et orthophosphates) est basée sur une réaction de coloration. En effet, ces sels réagissent dans
certaines conditions (température, pH, présence de catalyseurs, …) avec des réactifs (voir
annexe 2) pour donner une coloration absorbant la lumière à une certaine longueur d’onde (λ).
L’absorption de l’énergie lumineuse dépend de l’intensité de la coloration. Cette dernière
est d’autant plus importante que la solution est concentrée en sel dosé.
La quantité de lumière absorbée par la solution, appelée absorbance (A) ou densité
optique (D.O), obéit à la loi de BEER LAMBERT qui est exprimée par l’expression suivante :
A= D.O = log (I 0 /I) = ε.l.C
I 0 et I : sont respectivement l’intensité lumineuse incidente et émergente du milieu absorbant.
ε : le coefficient d’extinction molaire (varie en fonction de la température et de la longueur
d’onde).
l : la longueur du milieu traversée exprimée en cm.
C : concentration de la solution absorbante exprimée en mol/l.
A : absorbance de la solution.
D.O : densité optique de la solution.
2.4.5.2 Analyse automatique des sels nutritifs
L’analyse automatique des sels nutritifs consiste à réaliser automatiquement les
différentes manipulations nécessaires à un dosage manuel : prélèvements, analyse et lecture
(RODIER et al, 1996).
Dans notre étude, le dosage des sels nutritifs s’est fait par colorimétrie à flux continu sur
chaîne automatisée « Auto-Analyzer SAN pro PLUS » selon les protocoles définis par
le fabricant (SKALAR, 2000).
Le fonctionnement de l’appareil repose sur un principe dynamique simple, celui de
l’analyse liquide en flux continu :