Chapitre 3
Matériels et méthodes
46
Sa sonde unique est submersible, permette de réaliser simultanément des mesures in-situ, à de
grandes distances et grandes profondeurs (grande longueur de câble). Elle est occupée
également de quatre (4) capteurs.
L’électrode de l’appareil est plongée dans la bouteille NISKIN et la valeur du paramètre n’est
notée qu’après la stabilité de l’afficheur
3.2. Travaux au laboratoire
3.2.1. Dosage de la chlorophylle-a par la spectro-flurorimétrie ultraviolet
(S.F.U.V)
Les mesures de concentrations des pigments photosynthétiques sont des paramètres importants
pour l’étude de la production primaire dans les eaux douces et les océans. Parmi l’ensemble des
pigments phytoplanctoniques reconnus, la chlorophylle a (Chl a), commune à tous les
organismes photo-oxygéniques, est particulièrement étudiée, car il est la plus abondante et joue
un rôle clé dans le processus de la photosynthèse. Ainsi, la concentration en termes de
chlorophylle est certainement l’indicateur de biomasse phytoplanctonique le plus utilisé en
océanographie. Il permet de définir la fertilité d’un milieu et de calculer l’index de productivité
ou l’efficacité photosynthétique des organismes en présence (RAIMBAULT ET AL., 2004).
On note l’existence de plusieurs méthodes utilisées pour le dosage de la chlorophylle :
Mesure in-situ : en utilisant une sonde fluorimétrique ou la bathysonde équipe d’une
capture (fluo ou de chlorophylle).
Méthode d’analyse par fluorimétrie (fluorescence) ou spectrophotométrique (absorption
de la lumière).
Méthode d’analyse par la Chromatographie Liquide Haute Performance (HPLC).
Dans notre cas, la concentration en chlorophylle a est déterminée selon la méthode
fluorimétrique de (YENSTCH ET MENZEL, 1963) adaptée par (HOLM-HANSEN ET
RIEMAN, 1978) pour l'extraction des pigments à l'aide de l’acétone.
3.2.1.1. Matériel et appareillage
Dispositif de filtration et des filtres GF/F 0,45 µm de porosité (Figure 3.6, annexe 3).
Tubes de dosage de 10ml, et des tubes de 10ml pour la préparation des standards.
Centrifugeuse Hettich ZENTRIFUGEN de type EBA 30 (Figure 3.7, annexe3).
Spectrophotomètre fluorescence de type HITACHI modèle 650-10 S équipé d’une
lampe « Xénon » qui est la source du rayonnement UV et une cuvette en quartz de 1cm
de trajet optique (Figure 3.8, annexe 3).
Matériels courant de laboratoire.
Matériels et méthodes
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Sa sonde unique est submersible, permette de réaliser simultanément des mesures in-situ, à de
grandes distances et grandes profondeurs (grande longueur de câble). Elle est occupée
également de quatre (4) capteurs.
L’électrode de l’appareil est plongée dans la bouteille NISKIN et la valeur du paramètre n’est
notée qu’après la stabilité de l’afficheur
3.2. Travaux au laboratoire
3.2.1. Dosage de la chlorophylle-a par la spectro-flurorimétrie ultraviolet
(S.F.U.V)
Les mesures de concentrations des pigments photosynthétiques sont des paramètres importants
pour l’étude de la production primaire dans les eaux douces et les océans. Parmi l’ensemble des
pigments phytoplanctoniques reconnus, la chlorophylle a (Chl a), commune à tous les
organismes photo-oxygéniques, est particulièrement étudiée, car il est la plus abondante et joue
un rôle clé dans le processus de la photosynthèse. Ainsi, la concentration en termes de
chlorophylle est certainement l’indicateur de biomasse phytoplanctonique le plus utilisé en
océanographie. Il permet de définir la fertilité d’un milieu et de calculer l’index de productivité
ou l’efficacité photosynthétique des organismes en présence (RAIMBAULT ET AL., 2004).
On note l’existence de plusieurs méthodes utilisées pour le dosage de la chlorophylle :
Mesure in-situ : en utilisant une sonde fluorimétrique ou la bathysonde équipe d’une
capture (fluo ou de chlorophylle).
Méthode d’analyse par fluorimétrie (fluorescence) ou spectrophotométrique (absorption
de la lumière).
Méthode d’analyse par la Chromatographie Liquide Haute Performance (HPLC).
Dans notre cas, la concentration en chlorophylle a est déterminée selon la méthode
fluorimétrique de (YENSTCH ET MENZEL, 1963) adaptée par (HOLM-HANSEN ET
RIEMAN, 1978) pour l'extraction des pigments à l'aide de l’acétone.
3.2.1.1. Matériel et appareillage
Dispositif de filtration et des filtres GF/F 0,45 µm de porosité (Figure 3.6, annexe 3).
Tubes de dosage de 10ml, et des tubes de 10ml pour la préparation des standards.
Centrifugeuse Hettich ZENTRIFUGEN de type EBA 30 (Figure 3.7, annexe3).
Spectrophotomètre fluorescence de type HITACHI modèle 650-10 S équipé d’une
lampe « Xénon » qui est la source du rayonnement UV et une cuvette en quartz de 1cm
de trajet optique (Figure 3.8, annexe 3).
Matériels courant de laboratoire.