Chapitre II
Matériel & méthode
28
azoïque de couleur rose absorbant la lumière à 540 nm (Benschneider et Robinson, 1952 et
Skalar, 1998).
II.3.3.Dosage de l’azote nitrique
Les ions nitrates est la forme oxydée stable de l’azote en solution aqueuse. Il entre dans
le cycle de l’azote comme support principal de la croissance du phytoplancton. Il est généré à
partir des formes organiques par les bactéries.
La méthode de dosage est fondée sur la réduction des nitrates (N03
-
) en nitrites (N02
-
)
par passage de l’échantillon sur une colonne de cadmium traité au cuivre (Wood et al, 1967).
Les nitrites (en réalité NO2
- + NO3
- réduits) seront ensuite dosés par colorimétrie selon
la méthode précédemment décrite. Il suffira alors d’en déduire la concentration des nitrites
déterminés directement (sans passage de l’échantillon sur la colonne réductrice) pour trouver
les concentration des nitrates (Rodier et al., 1996).
II.3.4.Dosage des Orthophosphates (PO4 3- )
Le phosphore est un élément nutritif dont la forme minérale majoritaire est
l’orthophosphate. Il est essentiel à la croissance de phytoplancton. Dans les eaux de mer, les
orthophosphates sont présents principalement sous deux formes : PO4
- et HPO4
-
.
En présence d’antimoine tartrate de potassium à une température de 40 °C (bain marie),
les ions orthphosphates réagissent avec le molybdate d’ammonium par former un complexe
antimoine phosphomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique. (Rodier et al., 1996 in
Lourguioui, 2003). Cette forme réduite, de coloration bleue à un maximum d’absorption à 880
nm.
II.3.5.Dosage des silicates (SiO2)
Le silicium est élément indispensable pour certaines espèces phytoplanctoniques
(Diatomophyceae et Dictyochophyceae) ; il entre dans la composition de leurs squelettes. Le
silicium dissous se trouve sous la forme orthosilicique Si(OH)4 (représente 95%), et sous la
forme ionisée SiO(OH)3
Le silicium dissous (représenté dans l’eau par 95% sous forme d’acide orthosilicique
Si(OH)4, (Aminot et Chaussepied, 1983) réagit avec le molybdate d’ammonium en milieu
acide pour former un complexe silicomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique en un
composé coloré en bleu absorbant à 810 nm (Mullin et Riley, 1955). On ajoute l’acide oxalique
pour éviter les interférences des phosphates.
 Etalonnage
Cette opération consiste en une préparation de solution mère puis de solution fille pour
chaque élément à analyser. Les courbes d’étalonnage sont établies automatiquement par le
logiciel en utilisant les concentrations connues des solutions étalons et de leurs hauteurs de pic
correspondantes (Annexes n°2).