Chapitre deuxièmes :
Matérielles et méthodes
29
• Une coloration violet foncé apparait immédiatement sur le disque ou en quelques
secondes puis vire au noir indique que la bactérie produit une oxydase (Dellaras, 2007).
II.2.7.3. Recherche de la catalase :
La catalase est une enzyme présente chez la plupart des bactéries aérobies strictes et
anaérobies facultatives (Dellaras, 2007).Cette enzyme catalyse la décomposition du
peroxyde d’hydrogène (H₂O₂) qui est produit par certaines réactions cellulaires et très
toxiques, donc c’est l’une des enzymes chargée d’éponger l’eau oxygénée par la dismutation (PELMONT, 1993). La réaction catalysée est la suivante :
2H₂O₂
O₂ + 2H₂O
Mode opératoire :
• sur une lame propre, séchée, on dépose une goutte d’eau oxygénée.
• à l’aide d’une anse préalablement flambée, on dépose un fragment d’une colonie
bien isolée sur la goutte.
• l’observation est immédiate :
• Catalase(+) : apparition de bulles due aux dégagements gazeux de
dioxygène.
• Catalase(─) : absence d’effervescence ou de bulles
N.B : la coloration de Gram, le test de la catalase et celui de l’oxydase ont été réalisés sur les
colonies bactériennes suspectes. La pureté des souches a été vérifiée ultérieurement par
l’observation microscopique après coloration de Gram. Les souches pures sont obtenues par
plusieurs repiquages consécutifs.
Matérielles et méthodes
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• Une coloration violet foncé apparait immédiatement sur le disque ou en quelques
secondes puis vire au noir indique que la bactérie produit une oxydase (Dellaras, 2007).
II.2.7.3. Recherche de la catalase :
La catalase est une enzyme présente chez la plupart des bactéries aérobies strictes et
anaérobies facultatives (Dellaras, 2007).Cette enzyme catalyse la décomposition du
peroxyde d’hydrogène (H₂O₂) qui est produit par certaines réactions cellulaires et très
toxiques, donc c’est l’une des enzymes chargée d’éponger l’eau oxygénée par la dismutation (PELMONT, 1993). La réaction catalysée est la suivante :
2H₂O₂
O₂ + 2H₂O
Mode opératoire :
• sur une lame propre, séchée, on dépose une goutte d’eau oxygénée.
• à l’aide d’une anse préalablement flambée, on dépose un fragment d’une colonie
bien isolée sur la goutte.
• l’observation est immédiate :
• Catalase(+) : apparition de bulles due aux dégagements gazeux de
dioxygène.
• Catalase(─) : absence d’effervescence ou de bulles
N.B : la coloration de Gram, le test de la catalase et celui de l’oxydase ont été réalisés sur les
colonies bactériennes suspectes. La pureté des souches a été vérifiée ultérieurement par
l’observation microscopique après coloration de Gram. Les souches pures sont obtenues par
plusieurs repiquages consécutifs.