CHAPITRE II. MATERIEL ET METHODES
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Figure II.10: Auto analyser San Plus (SKALAR, 1996)
3. Détermination de la charge microbienne
L’objectif des analyses bactériologiques est d’évaluer la qualité hygiénique des effluents de
DDA et l’efficacité du traitement biologique et de la désinfection proposés durant cette étude
expérimentale ; en recherchant les germes pathogènes qui accompagnent les indicateurs de
contamination fécale. Les germes test recherchés sont donc les germes les Coliformes
(Coliformes totaux, Coliformes fécaux dont E. coli, les Streptocoques fécaux) et les germes
pathogènes (Salmonelles et Vibrions).
Dans le présent travail, nous avons opté pour la méthode de fermentation multiples ou du
nombre le plus probable pour l’évaluation de la charge microbienne des effluents bruts de DDA
et la méthode de filtration sur membrane pour les effluents traités par méthanisation et évapoconcentration.
3.1. Colimétrie en milieu liquide par la méthode du nombre le plus probable
(NPP)
Les coliformes se présentent sous forme de Bacilles à Gram négatifs (BGN), non sporogènes,
oxydase négative, aéro-anaérobies facultatifs, capables de croître en présence de sels biliaires et
capables de fermenter le lactose avec production d’acides et de gaz, en 24 à 48 heures à 37°C.
Les coliformes sont considérés comme indices de contamination fécale. La recherche et le
dénombrement des coliformes peuvent se faire selon deux méthodes de choix (LEBRES et al,
2002) :
• Soit en milieu liquide sur BLBVB par la technique du NPP (Nombre le Plus Probable) ou
la technique de fermentation en tubes multiples qui a pour principe d’ensemencer
plusieurs séries de tubes contenant des milieux de cultures liquides caractéristiques pour
chaque germes, après incubation on détermine le nombre caractéristique (nombre de
tubes positifs pour chaque dilution qui permettra l'établissement du nombre le plus
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Figure II.10: Auto analyser San Plus (SKALAR, 1996)
3. Détermination de la charge microbienne
L’objectif des analyses bactériologiques est d’évaluer la qualité hygiénique des effluents de
DDA et l’efficacité du traitement biologique et de la désinfection proposés durant cette étude
expérimentale ; en recherchant les germes pathogènes qui accompagnent les indicateurs de
contamination fécale. Les germes test recherchés sont donc les germes les Coliformes
(Coliformes totaux, Coliformes fécaux dont E. coli, les Streptocoques fécaux) et les germes
pathogènes (Salmonelles et Vibrions).
Dans le présent travail, nous avons opté pour la méthode de fermentation multiples ou du
nombre le plus probable pour l’évaluation de la charge microbienne des effluents bruts de DDA
et la méthode de filtration sur membrane pour les effluents traités par méthanisation et évapoconcentration.
3.1. Colimétrie en milieu liquide par la méthode du nombre le plus probable
(NPP)
Les coliformes se présentent sous forme de Bacilles à Gram négatifs (BGN), non sporogènes,
oxydase négative, aéro-anaérobies facultatifs, capables de croître en présence de sels biliaires et
capables de fermenter le lactose avec production d’acides et de gaz, en 24 à 48 heures à 37°C.
Les coliformes sont considérés comme indices de contamination fécale. La recherche et le
dénombrement des coliformes peuvent se faire selon deux méthodes de choix (LEBRES et al,
2002) :
• Soit en milieu liquide sur BLBVB par la technique du NPP (Nombre le Plus Probable) ou
la technique de fermentation en tubes multiples qui a pour principe d’ensemencer
plusieurs séries de tubes contenant des milieux de cultures liquides caractéristiques pour
chaque germes, après incubation on détermine le nombre caractéristique (nombre de
tubes positifs pour chaque dilution qui permettra l'établissement du nombre le plus