Contribution à la Différenciation Morphométriques et Génétique de Carassin Commun
(Carassius carassius)
Matériels et Méthodes
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Contrôle de qualité de l'extraction et quantification de l'ADN par électrophorèse :
Préparation du gel d'agarose :
 Préparation du gel d’agarose 0,8 % dans un tampon TBE (Tris Borate EDTA)
1X.
 Puis à l’aide d’uneplaque chauffante, fairefondre l’agarose avec une agitation
de temps à autre pour obtenir une solution homogène transparente et
dépourvue de particules, puis ajouter du bromure d’éthidium (BET) (0.5
µg/ml).
 Laisser refroidir jusqu'à ce qu'il devienne possible de saisir le flacon à main
nue (environ 45°C).
 Placer les joints fournis avec la cuve pour fermer le support de gel et
positionner le peigne à 1 mm du fond et à environ 1 cm de l'extrémité du
support. Régler le niveau pour que le support de gel soit horizontal.
 Couler lentement le gel sur 3 à 5 mm d'épaisseur en veillant à ce qu'il entoure
bien les dents du peigne, Laisser refroidir, enlever le peigne et les joints.
 Le gel est prêt pour le dépôt des échantillons.
Dépôt et migration :
 Remplir la cuve du tampon TBE (1X) puis immerger le gel et son support.
 Insérer délicatement la pointe de la pipette et injecter directement la totalité des
échantillons préparés dans les puits.
 Laisser migrer à 50v environ 30 minutes.
 Ampérage 254 nm.
Visualisation :
 Placer le gel sur la plaque UV et examiner les résultats après avoir enlevé
délicatement
le
gel
du
support.