| Matériel et Méthodes
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rouge (630-670 nm). Comme les caroténoïdes, co-extraits avec les chlorophylles, absorbent
eux aussi intensément dans le bleu, les mesures spectrophotométriques sont limitées aux
bandes d'absorption dans le rouge. La chlorophylle a est un paramètre « particulaire » qui,
pour une mesure précise en laboratoire, nécessite la récolte du matériel en suspension par
filtration, suivie d'une extraction du filtre par solvant (Aminot, et al., 2004).
Analyse au laboratoire
L’analyse de la chlorophylle-a passe impérativement par 4 étapes (méthodes non séparatives).
Tout au long de la procédure d’analyse, il faut manipuler à l’abri de la lumière pour éviter la
dégradation de la chlorophylle en phéopigments (Aminot, et al., 2004).
a. Filtration des échantillons
Les pigments chlorophylliens font partie du matériel particulaire, d’où l’intérêt de procéder à
une filtration. Après l’échantillonnage, l’eau doit être le plus rapidement possible filtrée.
La filtration des échantillons se fait comme suit :
- Préparation du système de filtration, en reliant la rampe de filtration avec la bouteille
de la récupération de l’eau et cette dernière avec la pompe de pression (pompe de la
mise sous vide).
- Rinçage des entonnoirs de la rampe par l’eau distillée.
- A l’aide d’une éprouvette et après une homogénéisation de l’échantillon par des
mouvements de rotation, mesurer 1.5 L de l’échantillon.
- Par une pince, placer un filtre de type GF/F de porosité 0.7 µm sur la base de
l’entonnoir.
- Verser l'échantillon dans l’entonnoir, appliquer le vide et s'assurer que la dépression
n'est pas excessive (0,2 bar).
- Juste avant que le filtre ne vienne à sec, rincer les parois de l’entonnoir avec un peu
d'eau distillée.
- Après assèchement du filtre, laisser fluer l'air quelques instants pour éliminer l'eau du
filtre.
- Si l'échantillon n'a pas été préfiltré, éliminer à la pince, si nécessaire, le zooplancton
visible à l'œil nu sur le filtre.
- A l’aide de deux pinces, plier le filtre une première fois, face chargée à l'intérieur,
plier une seconde fois le filtre et l'introduire dans le tube pour l’extraction.
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rouge (630-670 nm). Comme les caroténoïdes, co-extraits avec les chlorophylles, absorbent
eux aussi intensément dans le bleu, les mesures spectrophotométriques sont limitées aux
bandes d'absorption dans le rouge. La chlorophylle a est un paramètre « particulaire » qui,
pour une mesure précise en laboratoire, nécessite la récolte du matériel en suspension par
filtration, suivie d'une extraction du filtre par solvant (Aminot, et al., 2004).
Analyse au laboratoire
L’analyse de la chlorophylle-a passe impérativement par 4 étapes (méthodes non séparatives).
Tout au long de la procédure d’analyse, il faut manipuler à l’abri de la lumière pour éviter la
dégradation de la chlorophylle en phéopigments (Aminot, et al., 2004).
a. Filtration des échantillons
Les pigments chlorophylliens font partie du matériel particulaire, d’où l’intérêt de procéder à
une filtration. Après l’échantillonnage, l’eau doit être le plus rapidement possible filtrée.
La filtration des échantillons se fait comme suit :
- Préparation du système de filtration, en reliant la rampe de filtration avec la bouteille
de la récupération de l’eau et cette dernière avec la pompe de pression (pompe de la
mise sous vide).
- Rinçage des entonnoirs de la rampe par l’eau distillée.
- A l’aide d’une éprouvette et après une homogénéisation de l’échantillon par des
mouvements de rotation, mesurer 1.5 L de l’échantillon.
- Par une pince, placer un filtre de type GF/F de porosité 0.7 µm sur la base de
l’entonnoir.
- Verser l'échantillon dans l’entonnoir, appliquer le vide et s'assurer que la dépression
n'est pas excessive (0,2 bar).
- Juste avant que le filtre ne vienne à sec, rincer les parois de l’entonnoir avec un peu
d'eau distillée.
- Après assèchement du filtre, laisser fluer l'air quelques instants pour éliminer l'eau du
filtre.
- Si l'échantillon n'a pas été préfiltré, éliminer à la pince, si nécessaire, le zooplancton
visible à l'œil nu sur le filtre.
- A l’aide de deux pinces, plier le filtre une première fois, face chargée à l'intérieur,
plier une seconde fois le filtre et l'introduire dans le tube pour l’extraction.