Matériel et méthodes
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4.2 Test confirmatif
Les tubes présentant un trouble bactérien sont présumés contenir des streptocoques et sont
soumis à un test confirmatif. Il s’agit d’ensemencer chaque tube positif dans un tube
contenant du milieu Litsky. Après une incubation à 37°C pendant 24, les tubes positifs
présentent un trouble et pastille violette ou blanchâtre au fond du tube.
5. Recherche de Salmonella
La mise en évidence de Salmonella nécessite plusieurs phases:
- un pré-enrichissement (revivification) qui est facultatif pour les produits non soumis à
certains types de traitements technologiques susceptibles de “stresser” les bactéries.
- un enrichissement sélectif (obligatoire).
- un isolement sélectif
5.1 Pré-enrichissement (AFNOR 1973)
Conformément à la norme NF EN ISO 6579 et à la norme AFNOR V 08 013 :
La recherche des salmonelles se fait dans 25g de chair et de liquide inter-valvaire. La solution
mère (1/3) préalablement préparée est mise en contact avec 75 ml d’eau peptonée tamponnée.
L’incubation a été réalisée pendant 16 h au moins et 24 h au plus à 37°C.
5.2 Enrichissement
L’enrichissement a été effectué à partir de la solution obtenue précédemment par un
ensemencement sur le bouillon au sélénite-cystine (SFB) simple et double concentré :
 10 ml de la solution de pré-enrichissement est placée dans 10 ml de bouillon SFB
double concentré additionné de deux disques d’additifs SFB.
 1 ml de la solution de pré-enrichissement est placé dans 10 ml de bouillon SFB
simple concentré additionné d’un disque d’additif SFB.
Les deux tubes ont été incubés à 37°C pendant 18 heures.
5.3 Isolement
L’isolement a été fait à partir de chaque tube SFB (double et simple concentré) sur la surface
de la gélose Hektoene additionnée de l’additif Hektoene. Les boites ont été incubées à 37°C
pendant 18 à 24 heures (figure 16).
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