Chapitre II
Matériel et Méthodes
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2-3-2- Description des paramètres bactériologiques et techniques d’analyse
Un examen microbiologique ne peut être valablement interprété, que s’il est effectué :
- Sur un échantillon correctement prélevé, dans un récipient stérile.
- Selon un mode opératoire précis évitant toute contamination accidentelle.
- Correctement transportés au laboratoire, et analysé sans délai ou après une courte
durée de conservation dans des conditions satisfaisantes.
L’analyse bactériologique permet de réaliser une étude quantitative et qualitative de certains
germes, pour préciser l’état de salubrité du milieu d'étude. Parmi ces germes :
2-3-2-1- Les germes totaux
Mode opératoire
- A partir de l’eau à analyser et une dilution décimale de 10
-1,
prendre aseptiquement 1ml
en double dans deux boites de pétri vide, numérotées et préparées à cet usage.
- Compléter ensuite avec environ 19ml de gélose TGEA fondue puis refroidie à 45±2 °C.
- Faire ensuite des mouvements circulaires en forme de « 8» pour permettre à l’inoculum
de se mélanger à la gélose.
- Laisser solidifier les boites sur paillasse, puis rajouter une 2
éme
couche environ 5ml de la
même gélose.
- Les boites seront partagées en deux séries distinctes :
 La 1
ére
série sera incubée à 22±2°C pendant 68±4h.
 La 2
éme
série sera incubée à 36±2°C pendant 44±4h.
La lecture
Les colonies apparaissent en masse sous forme lenticulaire et bien distinctes. Retenir les
boites contenants moins de 300 colonies (la boite renferme au moins 15 colonies). Pour
déterminer la charge bactérienne dans l’eau à analyser on utilise la relation suivante :
ΣC
N=
1,1d
ΣC : somme des colonies sur les deux boites.
d : le taux de dilution correspond à la 1
ére
dilution.