Chapitre II
Matériel et Méthodes
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d’autant plus important que la coloration de la solution est plus intense. Cette coloration est à
son tour d’autant plus intense que la solution est plus concentrée. La principale de la
colorimétrie obéit à la loi de BEER LAMBERT.
Loi de BEER LAMBERT : un faisceau de lumière monochromatique qui traverse une
solution ou un milieu de longueur (I) sera en partie absorbé par la solution et transmis après
avoir traversé cette même solution. La quantité de lumière absorbée par la solution appelée
absorbance (A) ou densité optique (D O) obéit à la loi de BEER LAMBERT qui s’exprime
par l’expression suivante :
A= D.O = log (I 0 /I) = .l.C
I 0 et I : sont respectivement l'intensité lumineuse incidente et émergente du milieu absorbant.
: Le coefficient d'extinction molaire (varie en fonction de la température et de la longueur d'onde).
l : la longueur du milieu traversée exprimée en cm.
C : concentration de la solution absorbante exprimée en mol/l. A : absorbance de la solution.
D.O : densité optique de la solution.
Analyse automatique des sels nutritifs
L'analyse automatique des sels nutritifs consiste à réaliser automatiquement les différentes
manipulations nécessaires à un dosage manuel : prélèvements, analyse et lecture (Rodier et
al., 1996).
Dans notre étude, le dosage des sels nutritifs s'est fait par colorimétrie à flux continu sur
chaîne automatisée « Auto-Analyzer SAN pro PLUS » selon les protocoles définis par le
fabricant (Skalar, 1998). Le fonctionnement de l'appareil repose sur un principe dynamique
simple, celui de l'analyse liquide en flux continu : une veine liquide progresse par
l'intermédiaire d'une pompe péristaltique en continu. Les réactions chimiques s'effectuent
dans cette veine en progression. L'analyse des échantillons est réalisée par séquence, ce qui
permet une grande cadence de travail.
Etalonnage
Pour réaliser l’étalonnage, il faut préparer une solution mère puis une solution fille pour
chaque élément à analyser (voir annexe 1).
Les droites d’étalonnage sont établies automatiquement par le logiciel en utilisant les
concentrations connues des solutions étalons et leurs hauteurs de pic correspondantes.
Matériel et Méthodes
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d’autant plus important que la coloration de la solution est plus intense. Cette coloration est à
son tour d’autant plus intense que la solution est plus concentrée. La principale de la
colorimétrie obéit à la loi de BEER LAMBERT.
Loi de BEER LAMBERT : un faisceau de lumière monochromatique qui traverse une
solution ou un milieu de longueur (I) sera en partie absorbé par la solution et transmis après
avoir traversé cette même solution. La quantité de lumière absorbée par la solution appelée
absorbance (A) ou densité optique (D O) obéit à la loi de BEER LAMBERT qui s’exprime
par l’expression suivante :
A= D.O = log (I 0 /I) = .l.C
I 0 et I : sont respectivement l'intensité lumineuse incidente et émergente du milieu absorbant.
: Le coefficient d'extinction molaire (varie en fonction de la température et de la longueur d'onde).
l : la longueur du milieu traversée exprimée en cm.
C : concentration de la solution absorbante exprimée en mol/l. A : absorbance de la solution.
D.O : densité optique de la solution.
Analyse automatique des sels nutritifs
L'analyse automatique des sels nutritifs consiste à réaliser automatiquement les différentes
manipulations nécessaires à un dosage manuel : prélèvements, analyse et lecture (Rodier et
al., 1996).
Dans notre étude, le dosage des sels nutritifs s'est fait par colorimétrie à flux continu sur
chaîne automatisée « Auto-Analyzer SAN pro PLUS » selon les protocoles définis par le
fabricant (Skalar, 1998). Le fonctionnement de l'appareil repose sur un principe dynamique
simple, celui de l'analyse liquide en flux continu : une veine liquide progresse par
l'intermédiaire d'une pompe péristaltique en continu. Les réactions chimiques s'effectuent
dans cette veine en progression. L'analyse des échantillons est réalisée par séquence, ce qui
permet une grande cadence de travail.
Etalonnage
Pour réaliser l’étalonnage, il faut préparer une solution mère puis une solution fille pour
chaque élément à analyser (voir annexe 1).
Les droites d’étalonnage sont établies automatiquement par le logiciel en utilisant les
concentrations connues des solutions étalons et leurs hauteurs de pic correspondantes.