Chapitre II
Matériel et Méthodes
41
2-2- Techniques et moyens de prélèvement
2-2-1- Choix et stérilisation des récipients (pour l’analyse microbiologique)
Les récipients utilisés doivent assurer, une fois bouchés, une protection totale contre toute
contamination. On a utilisé des flacons en verre de 500 ml.
Avant tout usage, tous les flacons sont rincés à l’eau acidulée (5% d’HCl) puis plusieurs fois à
l’eau bidistillée et aussitôt rebouchés. Les flacons et les bouchons sont stérilisés à l’autoclave
(120° C) durant 20 minutes.
2-2-3- Méthode de prélèvements
Nous avons utilisé la méthode la plus simple qui consiste à tenir la bouteille stérile prés de sa
base, de l’introduire sous la surface de l’eau (à 30 cm de profondeur) et retirer son bouchon
afin de pouvoir la remplir d’eau à la profondeur désirée. La bouteille est poussée doucement
dans l’eau pendant le remplissage pour éviter toute contamination de la main. Une fois la
bouteille est pleine, elle est fermée immédiatement sous l’eau, conservée à l’abri de la lumière
et de la chaleur dans une glacière. On a mesuré la température de l’eau, le pH et l’oxygène
dissous in situ.
2-2-4- Transport et conservation au laboratoire
Les échantillons doivent être transportés dans des glacières portatives (+4° C à l’abri de la
lumière). Les analyses bactériologiques doivent être exécutées au plus tard 24 heures après
les prélèvements.
Après la prise d’essai, il est recommandé de placer le reste du prélèvement utilisé au
réfrigérateur. Il peut arriver en effet que les premières lectures bactériologiques, 24 ou 48
heurs après l’ensemencement donnent des résultats inattendus, incitant à vérifier les analyses.
Un tel examen de contrôle n’aura évidement qu’une valeur indicative.
2-2-5- Mesures de sécurité à prendre au laboratoire
Pour éviter les contaminations il faut :
- Fermer les fenêtres et les portes du laboratoire pendant l’opération d’analyse.
- Stériliser l’ambiance du travail avec la lampe UV.
Matériel et Méthodes
41
2-2- Techniques et moyens de prélèvement
2-2-1- Choix et stérilisation des récipients (pour l’analyse microbiologique)
Les récipients utilisés doivent assurer, une fois bouchés, une protection totale contre toute
contamination. On a utilisé des flacons en verre de 500 ml.
Avant tout usage, tous les flacons sont rincés à l’eau acidulée (5% d’HCl) puis plusieurs fois à
l’eau bidistillée et aussitôt rebouchés. Les flacons et les bouchons sont stérilisés à l’autoclave
(120° C) durant 20 minutes.
2-2-3- Méthode de prélèvements
Nous avons utilisé la méthode la plus simple qui consiste à tenir la bouteille stérile prés de sa
base, de l’introduire sous la surface de l’eau (à 30 cm de profondeur) et retirer son bouchon
afin de pouvoir la remplir d’eau à la profondeur désirée. La bouteille est poussée doucement
dans l’eau pendant le remplissage pour éviter toute contamination de la main. Une fois la
bouteille est pleine, elle est fermée immédiatement sous l’eau, conservée à l’abri de la lumière
et de la chaleur dans une glacière. On a mesuré la température de l’eau, le pH et l’oxygène
dissous in situ.
2-2-4- Transport et conservation au laboratoire
Les échantillons doivent être transportés dans des glacières portatives (+4° C à l’abri de la
lumière). Les analyses bactériologiques doivent être exécutées au plus tard 24 heures après
les prélèvements.
Après la prise d’essai, il est recommandé de placer le reste du prélèvement utilisé au
réfrigérateur. Il peut arriver en effet que les premières lectures bactériologiques, 24 ou 48
heurs après l’ensemencement donnent des résultats inattendus, incitant à vérifier les analyses.
Un tel examen de contrôle n’aura évidement qu’une valeur indicative.
2-2-5- Mesures de sécurité à prendre au laboratoire
Pour éviter les contaminations il faut :
- Fermer les fenêtres et les portes du laboratoire pendant l’opération d’analyse.
- Stériliser l’ambiance du travail avec la lampe UV.