Matériel et méthodes
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 Expression des résultats
Le calcul du pourcentage et de la pureté de la phycocyanine extraite par solvant et par séparation
aqueuse à double phases est fait selon l‟équation de BENNETT et BOGORAD (1973)
PC (mg/ml) = (Abs 615 -0,474 × Abs 652 )/5, 34
La pureté de phycocyanine est déduite selon la formule : Abs 620 /Abs 280 .
Avec :
Abs à 620 nm indiquant la concentration de la phycocyanine.
Abs à 280 nm indiquant la concentration totale des protéines.
III.4. Dosage par spectrophotométrie des différents pigments de la spiruline
Le dosage quantitatif des différents pigments de la spiruline par spectrophotométrie a été réalisé
au laboratoire LBCM2 de l‟ENSSMAL.
 Principe
Le principe de la spectrophotométrie est basé sur la loi de Beer-Lambert : la densité optique
d‟une solution d‟une substance absorbante dans un solvant non absorbant est proportionnelle a
l‟épaisseur de la solution traversée et à la concentration de la solution.
 Expression des résultats
D.O = ε.I.C.
Avec :
D.O : densité optique (nm).
C : concentration molaire volumique (mol /l).
ε : coefficient d‟extinction molaire, fonction de λ.
La loi de Beer-Lambert est valable si les solutions sont très diluées.
III.4.1. Dosage des caroténoïdes
 Mode opératoire :
-L‟extrait sec de caroténoïde est récupéré avec 25 ml d‟hexane (Voir annexe figure 8).
Préparation de la gamme étalon (BENK, 1960) in AKROUR. AISSOU.,2020
-La solution de bichromate de potassium standard est préparée par dissolution de 0.0036 g dans
100 ml, chaque ml de la solution correspond à 0.0266 mg de caroténoïdes totaux calculés comme
β – carotène (Voir annexe figure 9).