Matériel et méthodes
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 Principe
L‟extraction par un solvant est une technique sélective qui repose sur la solubilité des espèces à
extraire dans un solvant donné ; le solvant doit alors être non miscible à l‟eau, dissoudre facilement
l‟espèce à extraire, et être liquide à la température de l‟extraction (d‟où l‟appellation liquide
liquide). Sa densité nous permet de situer la position de la phase organique pour achever
l‟extraction.
Lors du contact entre la solution et le solvant d‟extraction, l‟espèce chimique passe de l‟un à
l‟autre.
 Mode opératoire
- 4 g de spiruline est versée dans 120 ml de tampon phosphate, on incube à l‟obscurité pendant 12
h à 4 °C pour permettre la lyse des cellules.
-On récupère le surnageant bleu après centrifugation, après on lui rajoute 120 ml du tampon
phosphate, et on incube une deuxième fois à l‟obscurité pendant 12 h.
-On centrifuge une deuxième fois, et on mélange les deux surnageant afin de lire l‟absorbance à
615 nm, à 652 nm, à 620 nm et 280 nm.
Figure 11 : Extraction de la phycocyanine par solvant
III.3.2.2. Extraction par séparation aqueuse à double phase
Cette méthode est faite selon le protocole de BULGARIU et al., 2008.
Incuber 4 g de spiruline avec 120 ml de tampon phosphate à
l‟obscurité à 4° C pendant 12 h
Centrifuger pour la première fois et récupérer le surnageant
bleu
Lire l‟absorbance à 280 nm, 615 nm, 620 nm et 652 nm
Centrifuger pour une deuxième fois et mélanger les deux
surnageants
Rajouter 120 ml de tampon phosphate au précipité et incuber
12hrs à l‟obscurité