Matériel et méthodes
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-On prélève 10 ml du filtrat dans 10 ml d‟eau distillée auquel on ajoute [0.25 ml - 0.5 ml] de
phénol phtaléine tout en agitant.
-A l‟aide d‟une burette, on verse la solution d‟hydroxyde de sodium NaOH 0.1 N jusqu‟à
l‟obtention d‟une couleur rose persistante pendant 30s.
 Expressions des résultats
L‟acidité titrable est exprimée en gramme acide citrique selon l‟équation suivante :
Avec :
M : Masse en gramme de l‟échantillon prélevé.
V 0 : Volume en millilitre d‟une prise d‟essai.
V 1 : Volume en millilitre de l‟hydroxyde de sodium.
0.07 : Facteur d‟une conversion de l‟acidité titrable en équivalent d‟acide citrique.
III. Analyses quantitatives par Spectrophotométrie
III.1. Extraction des pigments caroténoïdes
 Principe
L‟extraction des caroténoïdes a été réalisée au laboratoire de l‟ENSSMAL, la méthode choisie est
celle de VICTOR et al., 1995 in AISSOU, 2020 (polycopié des travaux pratiques 4
éme année
aquaculture).
 Mode opératoire
- On extrait 5 g de spiruline à l‟aide d‟un Buchner sous vide avec 40 ml d‟hexane – éthanol (1:1).
-On répète la filtration jusqu‟à l‟obtention d‟un résidu incolore (dans notre cas 8 fois) on ajoute
le même volume KOH méthanoïque à 10% au volume du filtrat obtenu puis on le met dans un
flacon brun qu‟on chauffe au bain marie à 40°C pendant 10 minutes.
-Afin d‟interrompre la saponification, le flacon est mis dans un bac de glace.
-Le mélange obtenu est transvasé dans une ampoule à décanter, on y ajoute 25 ml d‟hexane et 20
ml d‟eau distillée puis on agite légèrement.
-On obtient deux phases : phase organique et phase aqueuse (Voir annexe figure 4).
-D‟autres extractions sont faites sur la phase aqueuse, en ajoutant 40mL Hexane – Ethanol (1:1),
et la phase organique obtenue est rajoutée aux phases organiques obtenues précédemment.