Partie II : Matériel et méthodes
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B). Coloration de Gram (voir figure N
o
15).
 Coloration primaire : couvrir le frottis fixée avec le violet de gentiane et
laisser pendant 2 min. jeter l’excès de colorant.
 Mordançage : égoutter sans rincer et faire deux bains de Lugol dont chacun
dure 45 sec.
 Décoloration : égoutter et plonger la lame dans l’alcool 96
0 durant 30 sec,
rincer doucement et abondamment à l’eau distillée.
 Coloration secondaire : recolorer le frottis avec la fuchsine pendant 2 min
(Delarras, 2007).
 laver à l’eau distillée et sécher la lame au-dessus de la flamme.
Figure N
o 15 : Étapes de la coloration de Gram.
Coloration primaire
2 min
Mordançage
Décoloration
Coloration secondaire
2 min
2*45 sec
30 sec
Alcool 96 0
lugol
violet de gentiane
fuchsine
Rincer avec l'eau.
Sechage
Idir,L;Bahloul,F,2013