Matériel et méthodes
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caractérisée par oxydase négatif et catalase positif. Ce sont composées d’environ 2000
stéréotypes qui sont pathogènes pour l’homme et animaux (HUSS, 1988).
➢ Mode opératoire :
• Enrichissement
1
er enrichissement :
- Peser 25 g de la farine.
- Ajouter 225 ml de milieu SFB (bouillon au Sélénite) + 4 disques SFB dans des flacons
stériles de 500 ml.
- Agiter pendant 2 min.
- Incuber à 37°C pendant 24h.
- Lecture : les flacons considérés positifs présentent un virage de couleur vers le jaune –
orange.
2
éme enrichissement :
- Transférer 1ml de bouillon du 1
er enrichissement dans un tube contenant 10 ml d’SFB + 2
disques SFB.
- Incuber à 37°C pendant 24h.
• Isolement
1
er isolement :
- A partir du 1
er enrichissement, la culture est repiquée sur la gélose S-S en stries.
- L’incubation se fait à 37°C pendant 24h.
2 éme isolement :
- A partir du 2
éme enrichissement, la culture est repiquée sur la gélose S-S en stries.
- L’incubation se fait à 37°C pendant 24h.
➢ Lecture : les colonies suspects apparaissent : incolore avec ou sans centre noire.
• Purification :
- Ré-isolement sur gélose S-S pour obtenir des colonies pures.
• Identification biochimique
- Coloration de Gram (bacilles Gram négatif).
- Catalase (positif)
- Oxydase (négatif)
- Mobilité (se fait sur Mannitol-mobilité ; si jaune : mannitol +, si rouge : mannitol -)