Matériel et méthodes
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b. Mode opératoire :
- Ajouter à un gramme d’échantillon (M0) 20 ml de chloroforme et 10 ml de
méthanol.
- A l’aide d’un agitateur magnétique, agiter vigoureusement le mélange pendant
60 min.
- Filtrer le mélange sur Büchner muni d’un papier Wattman (figure 9 (a)).
- Laver le reste avec un mélange de chloroforme-méthanol (20 :10, v/v).
- Après filtration, récupérer tout le filtrat puis transvaser dans une ampoule à
décanter (figure 9 (b)).
- Ajouter le KCl 0.8 % à raison de 20% du volume totale du filtrat.
- Laisser décanter le mélange pendant environ 30 min, entre-temps peser un
ballon vide après l’avoir séché et refroidi (M1).
- Récupère la phase organique (contant les lipides) dans le ballon.
- Placer le ballon dans l’évaporateur rotatif (rot à vapeur) afin d’éliminer le
solvant sous pression réduite (figure 9 (c)).
- Peser le ballon et lipides obtenus (M2) (figure 9 (d)).
c. Calcul :
La teneur en lipides est calculée comme suit :
L%=
(𝑀2−𝑀1)∗100
𝑀0
Tel que :
M0 : masse de la prise d’essai (g).
M1 : masse du ballon vide (g)
.M2 : masse du ballon et lipides (g).
(a)
(b)
(c)
(d)
Figure 9. (a): Filtration du mélange,(b): décantation du mélange, (c): Ballon placé au rot à vapeur et
(d): Pesage du ballon +lipides.