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fluorescente. Le signal fluorescent est directement proportionnel à la quantité d’amplicons
générés durant la réaction de PCR. La méthode de PCR en temps-réel a été effectuée en
utilisant la technologie de fluorescence SYBR-Green I (BESBES et SADOK, 2015).
Le tableau présente un rendement élevé de l’ADN en termes de qualité et quantité pour tous
les échantillons de crevette analysés à l’état frais et transformé. Afin de valider cette méthode
de quantification, 15 échantillons de crevettes ont été quantifiés en utilisant la méthode de
PCR en temps-réel. Tous les échantillons sont détectables (BESBES et SADOK, 2015).
Tableau II.6 : Résultats obtenus de rendement de l’ADN en termes de qualité et quantité pour
tous les échantillons de crevette analysés.
Nous avons eu des amplifications PCR de crevette avec un Ct moyen de 33 (cycle seuil) et
un Tm qui est de l’ordre de 72°C, un exemple de courbe d’amplificationest donné dans la
figure 1. L’analyse des résultats montre que les conditions d’amplification ont été optimisées
pour ces deux couples d’amorces et nous avons ainsi réussir à amplifier les 15 espèces de
crevettes (BESBES et SADOK, 2015).
La PCR-RFLP
La technique PCR-RFLP est l'association entre les techniques d'amplification et
d'observation de polymorphismes sur des fragments digérés par des enzymes de restriction.
D'un point de vue technique, la méthode RFLP est utilisée pour refléter directement des
variations dans la séquence primaire de l'ADN. Cette technique a permis d'observer de