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Les marqueurs nucléaires ont été utilisés pour séparer entre P.neogaeus, P.eos (parentale ou
cybride) et les hybrides. Tandis que pour séparer entre P.eos et cybrides les loci localisés
dans l’ADNmt ont été utilisés, et pour la séparation entre les espèces diploïdes et les
triploïdes, les marqueurs hypervariables ont été utilisés.
En utilisant les loci spécifiques:
-GH et PEG1/MEST pour le génome nucléaire
-COI pour le génome mitochondrial
La technique de PCR a été appliquée et les résultats obtenus sont dressés dans la figure 21
Figure II.21: Les résultats de PCR (ANGRES et al,2005)
Les figures II.21 a et b: Pour les locus GH et PEG1/MEST, respectivement, montrent que les
hybrides ont les 2 bandes l’un de P.eos et l’autre de P-neogaeus et les cybrides ont une seule
bande provenant de P.eos.
Figure II.21 c : Le locus COI du génome mitochondrial permet la discrimination entre P.eos et
cybride.
PCR multiplex
Le terme de "PCR multiplexe" désigne une mise au point de la technique PCR autorisant
l'amplification, en une seule réaction, de plusieurs segments d'ADN distincts (Khazaal, 2005)