Matériel et méthodes
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Tableau 7: Coordonnées géographiques de la plage Colonel Abbes (coordonnées GPS).
Coordonnées
DMS
Latitude
36 ° 41ˈ 30.748ˈˈ
Longitude
2 ° 47 ˈ 37.64ˈˈ
Altitude
21m
II.2. Prélèvement et transport des échantillons
Les échantillons d’eau de mer ont été collectée dans des flacons stériles de 500ml à 20cm de
profondeur et à une distance de 1m du bord de mer.
Les flacons sont tenus à la main près des points de prélèvement puis plongés dans l’eau et
refermé sous l’eau, après le remplissage, afin d’éviter toute contamination.
Alors que les sédiments ont été prélevés manuellement dans des sachets stériles.
Un étiquetage précis a été élaboré pour la reconnaissance des stations de prélèvements une fois
au laboratoire.
Les échantillons ont été transportés au laboratoire dans une glacière et les analyses ont été
effectuées dans les 6 heures qui ont suivi le prélèvement.
II .2. Méthodes
II.2.1. Analyse microbiologique des échantillons
II 2.1.1 Dénombrement des coliformes totaux et fécaux dans l’eau par la méthode
de filtration sur membrane
Cette méthode consiste à la filtration de 100 ml de l’échantillon ou de ses dilutions sur une
membrane stérile en ester de cellulose, de porosité 0,45 μm, placée dans une rampe de filtration
en inox de six postes dans des conditions stériles (Rodier et al. 2009). La membrane est déposée
à la surface d’un milieu de culture choisi selon la recherche.
Technique
Dans des conditions stériles, la membrane est déposée en utilisant des pinces stériles sur la
plaque poreuse nettoyée avec de l’alcool stérile. Un volume de 100 ml d’échantillon agité
soigneusement est filtré. Après filtration, la membrane est déposée à la surface d’une gélose au
Tergitol pour la recherche des coliformes totaux et thermotolérants. L’incubation du milieu est
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Caractérisation et évaluation de la résistance aux antibiotiques chez les entérocoques sp isolés dans le milieu marin: - 32/72

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