Chapitre II : Matériel et Méthodes
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Partie II : Etude biologique et traitement des donnés
1. Préparation pour analyse
Avant d‟accéder à l‟analyse du phytoplancton et du microphytobenthos, il faut respecter quelques
notions :
• L‟équilibre thermique : le matériel et l‟échantillon aussi doivent être à température similaire
pour une disposition aléatoire de particules phytoplanctoniques ;
• L‟homogénéisation d‟échantillon (30 retournements doux) du flacon.
2. Etude biologique du peuplement phytoplanctonique
a) La méthode d‟UTERMÖHL
Le dénombrement des cellules micro-algales durant ce travail a été effectué
sur des échantillons de 50 ml, à l‟aide d‟un microscope inversé (OPTIKA) conformément à la
méthode d‟UTERMÖHL (1958).
Cette méthode présente l‟avantage d‟une estimation qualitative et quantitative du phytoplancton, elle
permet le dénombrement du phytoplancton, ainsi que l‟observation de chaque cellule. (Dadi, 2002)
b) Chambre de sédimentation
La chambre de sédimentation dite aussi la cuve d‟UTERMÖHL, utilisée pour sédimenter notre souséchantillon ainsi le décanter pendant une période de 24h, à l‟abri de la lumière et à une température
ambiante, en évitant les vibrations.
c) Les étapes suivies pour la sédimentation
On a plusieurs types de chambre de sédimentation, tout dépend de la densité des cellules dans le
milieu (10 ; 50 ; 100ml). Nous avons travaillé dans le cadre de cette étude avec un volume de 25 ml
et nous avons mené les étapes suivantes :
- Homogénéiser le contenu du flacon par 30 retournements doux (agiter doucement pour ne pas
détruire la morphologie des particules phytoplanctoniques) ;
- Remplir la cuve directement par le flacon (verser rapidement pour éviter la décantation des
espèces) jusqu'à la surface de la cuve tout en évitant la formation des bulles d‟air ;
- Laisser la cuve se sédimenter pendent un temps qui dépend du volume utilisé (24h pour
25ml) ;
- Placer la cuve pour observation sous microscope inversé.
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Partie II : Etude biologique et traitement des donnés
1. Préparation pour analyse
Avant d‟accéder à l‟analyse du phytoplancton et du microphytobenthos, il faut respecter quelques
notions :
• L‟équilibre thermique : le matériel et l‟échantillon aussi doivent être à température similaire
pour une disposition aléatoire de particules phytoplanctoniques ;
• L‟homogénéisation d‟échantillon (30 retournements doux) du flacon.
2. Etude biologique du peuplement phytoplanctonique
a) La méthode d‟UTERMÖHL
Le dénombrement des cellules micro-algales durant ce travail a été effectué
sur des échantillons de 50 ml, à l‟aide d‟un microscope inversé (OPTIKA) conformément à la
méthode d‟UTERMÖHL (1958).
Cette méthode présente l‟avantage d‟une estimation qualitative et quantitative du phytoplancton, elle
permet le dénombrement du phytoplancton, ainsi que l‟observation de chaque cellule. (Dadi, 2002)
b) Chambre de sédimentation
La chambre de sédimentation dite aussi la cuve d‟UTERMÖHL, utilisée pour sédimenter notre souséchantillon ainsi le décanter pendant une période de 24h, à l‟abri de la lumière et à une température
ambiante, en évitant les vibrations.
c) Les étapes suivies pour la sédimentation
On a plusieurs types de chambre de sédimentation, tout dépend de la densité des cellules dans le
milieu (10 ; 50 ; 100ml). Nous avons travaillé dans le cadre de cette étude avec un volume de 25 ml
et nous avons mené les étapes suivantes :
- Homogénéiser le contenu du flacon par 30 retournements doux (agiter doucement pour ne pas
détruire la morphologie des particules phytoplanctoniques) ;
- Remplir la cuve directement par le flacon (verser rapidement pour éviter la décantation des
espèces) jusqu'à la surface de la cuve tout en évitant la formation des bulles d‟air ;
- Laisser la cuve se sédimenter pendent un temps qui dépend du volume utilisé (24h pour
25ml) ;
- Placer la cuve pour observation sous microscope inversé.