Chapitre III
Matériel et méthodes
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2.5. Détermination de la chlorophylle-a par la spectrophotométrie
2.5.1. Principe
Les mesures de concentration des pigments photosynthétiques sont des paramètres
importants pour l’étude de la production primaire dans les eaux douces et les océans.
Parmi l’ensemble des pigments phytoplanctoniques reconnus, la chlorophylle a (Chl a),
commune à tous les organismes photooxygéniques, est particulièrement étudiée, car elle
est la plus abondante et joue un rôle clé dans le processus de la photosynthèse. Ainsi, la
concentration en termes de chlorophylle est certainement l’indicateur de biomasse
phytoplanctonique le plus utilisé en océanographie. Il permet de définir la fertilité d’un
milieu et de calculer l’index de productivité ou l’efficacité photosynthétique des
organismes en présence (Raimbault et al., 2004).
Dans notre cas, nous avons utilisé la méthode monochromatique de LORENZEN (1967).
Après filtration d’un certain volume d’eau de mer, pour concentre le matériel
particulaire, le filtre est immergé dans un solvant qui assure l’extraction des pigments ;
puis on mesure l’absorbance de l’extrait a une ou plusieurs longueur d’onde avant et
après acidification si l’on recherche également les formes dégradées (Aminot et
Chausse-pied, 1983).
2.5.2. Matériel et appareillages
Le matériel utilisé est le suivant :
- Dispositif de filtration et des filtres GF/F 0,7 μm de porosité;
- Tubes de dosage de 10ml;
- Centrifugeuse Sigma;
- Spectrophotomètre ultraviolet a double faisceaux de type UV-1800, SHIMADZU;
- Matériels courant de laboratoire.
2.5.3. Réactifs
Les réactifs utilisés sont les suivants :
- Suspension carbonate de magnésium MgCO3 à 1%;
- Solvant d’extraction : l’acétone 90%.