PROTEINES ETACIDESAMINES
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…______
-
©
@
On vort que le pHi correspond à un équilibre entre les formes Aæ, Aeet
A .Le calcul dupHi de GLU se fera donc comme suit :
‘
_
pKa +
2,19 + 4,25..
pH1= ""‘—"2—'—
=
———2——
Dans le cas de la LYS le schéma est le suivant :
‘
_
COOH
C009coo®s
'
c‘009
el
—H®
@.l
l«
—H® —
|
H3N—ŸH
…
1 +H
(CH2)4
”1
(CH2)4
*
(ICH—;).
pKa Î2,18 I‘\IH3Œ pKb|=8,95
pK’bà
Zone acide
‘
ç
…
Zone“baSique
-
,
.-_—___
_
_
_
—
équilibre au pHi
”
Le pH1 dela LYS est donc lesuivant :
‘
j
»
pK_b«+ pK’b
8,95 + 10,53
_
pHi=
——î— =_ '—‘2—_——
.Lacolonne de résine échangeuse de cations est constituée de grains
de résine disposés entre deux diaphragmes et portant des groupements sulfonés ( -'—SOÎ ) à leur surface; Cescñargese se trouvent au départ sous fonne
de sels de Na @ (g. @ ). Le mélange des acides (::—aminés est déposé au sommet 'de la colonne et —doit‘ être
de cations A9. II faut donc les
'
saturer en protons et pour cela on les place dans
tampon dont le pH est
'
plus acide que les pHi de_tous les acides a—aminés présents dans le mélange.
Ces pHi sont respeCtivement de 2,87 pour ASP ; 5,75 pour MET ; 9,74 pour
LYSet
pour
ARG. Le tampon
de départ peut être par exemple à un
pH de
On a représenté sur“la gure A les étapes successives de l’élution par différents milieux tænponnés présentant un gradient de pH croissant et renferdessels de Na®;
(Le vnùië‘ de la colonne compris entre les deux diaphragmes est de V ml).
équilibrée par les ions Na®.
‘
mélange des acides oz-aminés en solution dans le milieu