Les ondes lumineuses 277
Exemple raisonné 17.6
Une solution de NADH a été préparée de manière à ce qu'elle
donne une absorbance de 1 à 340 nm dans une cuvette dont le
trajet optique est de 1 cm. L'absorptivité molaire du NADH vaut
6.220 cm dm 3 mol- 1 • Calculer la concentration du NADH dans cette
solution.
Réponse
Il faut faire intervenir la loi de Beer-Lambert, c'est-à-dire A = e cl .
Cette équation doit être remaniée pour isoler le terme c. Pour ce
faire, il suffit de diviser les deux membres de ladite équation par e l,
ce qui donne :
A
E cl
-;/ = ---;/ '
puis on simplifie e l dans le membre de droite, ce qui se réduit, en
introduisant les valeurs ad hoc, à:
c =
1
6.220 cm dm 3 moi- • x 1 cm
= l,6 x l0 - 4mol dm - 3
Question 17 .6
Le coefficient d'extinction molaire d'une molécule à 525 nm vaut
5.400 cm dm 3 moI- 1 . Quelle serait, à 525 nm, l'absorbance d'une
solution 0,0001 M, sachant que le trajet optique de la cuvette est
de 1 cm ?
17.7
Le spectrophotomètre
L'instrument qui permet de mesurer l'absorption d'une onde lumineuse est ce qu'on appelle un spectrophotomètre. Une représentation
schématique d'un tel appareil est donnée dans la figure 17.12. Son fonctionnement est, somme toute, assez simple. L'onde lumineuse, habituellement en provenance d'une lampe à filament de tungstène (pour la
région du visible) ou d'une lampe au deutérium (pour la région UV),
aboutit à un miroir. On peut faire pivoter ce dernier de manière à ce
qu'il réfléchisse, vers l'appareil de mesure, le type de lumière désiré
(visible ou ultraviolet). Le rayonnement ainsi sélectionné passe ensuite
au travers d'une fente dont la largeur peut être aj ustée afin de modifier
la quantité
de manière adéquate l'angle du prisme (ou du miroir de convergence),
il est possible de sélectionner la longueur d'onde de la lumière dont on
désire mesurer l'absorbance. Il existe des instruments plus modernes qui
fonctionnent selon d'autres moyens de diffraction de la lumière comme,
par exemple, des miroirs holographiques ou des grilles de diffraction
qui permettent également de résoudre les ondes lumineuses en leurs
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Exemple raisonné 17.6
Une solution de NADH a été préparée de manière à ce qu'elle
donne une absorbance de 1 à 340 nm dans une cuvette dont le
trajet optique est de 1 cm. L'absorptivité molaire du NADH vaut
6.220 cm dm 3 mol- 1 • Calculer la concentration du NADH dans cette
solution.
Réponse
Il faut faire intervenir la loi de Beer-Lambert, c'est-à-dire A = e cl .
Cette équation doit être remaniée pour isoler le terme c. Pour ce
faire, il suffit de diviser les deux membres de ladite équation par e l,
ce qui donne :
A
E cl
-;/ = ---;/ '
puis on simplifie e l dans le membre de droite, ce qui se réduit, en
introduisant les valeurs ad hoc, à:
c =
1
6.220 cm dm 3 moi- • x 1 cm
= l,6 x l0 - 4mol dm - 3
Question 17 .6
Le coefficient d'extinction molaire d'une molécule à 525 nm vaut
5.400 cm dm 3 moI- 1 . Quelle serait, à 525 nm, l'absorbance d'une
solution 0,0001 M, sachant que le trajet optique de la cuvette est
de 1 cm ?
17.7
Le spectrophotomètre
L'instrument qui permet de mesurer l'absorption d'une onde lumineuse est ce qu'on appelle un spectrophotomètre. Une représentation
schématique d'un tel appareil est donnée dans la figure 17.12. Son fonctionnement est, somme toute, assez simple. L'onde lumineuse, habituellement en provenance d'une lampe à filament de tungstène (pour la
région du visible) ou d'une lampe au deutérium (pour la région UV),
aboutit à un miroir. On peut faire pivoter ce dernier de manière à ce
qu'il réfléchisse, vers l'appareil de mesure, le type de lumière désiré
(visible ou ultraviolet). Le rayonnement ainsi sélectionné passe ensuite
au travers d'une fente dont la largeur peut être aj ustée afin de modifier
la quantité
de manière adéquate l'angle du prisme (ou du miroir de convergence),
il est possible de sélectionner la longueur d'onde de la lumière dont on
désire mesurer l'absorbance. Il existe des instruments plus modernes qui
fonctionnent selon d'autres moyens de diffraction de la lumière comme,
par exemple, des miroirs holographiques ou des grilles de diffraction
qui permettent également de résoudre les ondes lumineuses en leurs
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