Ganglions sentinelles 141
mRNA, le seuil décisionnel OSNA a été établi pour approximativement 5000
cellules soit 5 000 000 de copies, l’échantillon étant dilué au 1:20000 le seuil
équivaut à 250 copies /μl. Ces seuils de détection obtenus par cette approche
mathématique constituant un modèle théorique ont pu ensuite être confirmés
à partir d’études de spécificités menées sur des échantillons négatifs de patients
pN0, mais également à partir d’études de sensibilité sur des échantillons positifs provenant de patientes pN1-pN3.
Interprétation des résultats : à la fin de chaque série d’analyse et si les contrôles
de qualité sont acceptés, un compte rendu est généré automatiquement. Le
temps d’élévation est indiqué pour chaque lysat ainsi que le nombre de copies
d’ARNm CK19 par microlitre de lysat déterminé à partir de la courbe de
calibration. Les résultats sont interprétés comme suit (–) absence de métastase,
(+) micrométastase, (++) macrométastase, (+)i positif par inhibition, nombre
de copies dans le lysat dilué supérieur au nombre de copies dans le lysat pur,
présence d’une métastase. Actuellement, des investigations sont en cours pour
améliorer l’interprétation des résultats par inhibition et des modifications dans
l’interprétation déjà validées par le fournisseur (tableau I).
Tableau I - Interprétation des résultats OSNA en fonction du nombre de copies d’ARNm CK19 dans
le lysat pur et dilué au 1/10.
Nbre de copies
ARNm CK19
/μl de
l lysat pur
Nbre de copies
ARNm CK19
/μl de lysat dilué
Résultat
qualitatif
RD-100i
Interprétation du résultat
< 250
< 250
(–)
Absence de métastase
> 250 et < 5 000
< 5 000
(+)
Micrométastase
> 5 000
quel que soit le
nombre
(++)
Macrométastase
< 250
> 250 et < 5 000
(+) i
En faveur d’une micrométastase
> 250 et < 5 000
> 5 000
(+) i
En faveur d’une macrométastase
< 250
> 5 000
(+) i
En faveur d’une macrométastase
Cellules grisées : modifications dans l’interprétation par rapport à la version initiale du
fournisseur suite à des études permettant de mieux quantifier en présence d’une inhibition.
OSNA et cancer du sein
La première étude publiée par une équipe japonaise a montré une concordance de 98,2 % entre l’analyse OSNA et l’analyse histologique pour la détection des métastases ganglionnaires de plus de 0,2 mm des cancers du sein [27].
Des études de validation ont été menées dans différents pays européens et au
Japon. Ces études ont confirmé la possibilité d’utiliser OSNA pour détecter les
mRNA, le seuil décisionnel OSNA a été établi pour approximativement 5000
cellules soit 5 000 000 de copies, l’échantillon étant dilué au 1:20000 le seuil
équivaut à 250 copies /μl. Ces seuils de détection obtenus par cette approche
mathématique constituant un modèle théorique ont pu ensuite être confirmés
à partir d’études de spécificités menées sur des échantillons négatifs de patients
pN0, mais également à partir d’études de sensibilité sur des échantillons positifs provenant de patientes pN1-pN3.
Interprétation des résultats : à la fin de chaque série d’analyse et si les contrôles
de qualité sont acceptés, un compte rendu est généré automatiquement. Le
temps d’élévation est indiqué pour chaque lysat ainsi que le nombre de copies
d’ARNm CK19 par microlitre de lysat déterminé à partir de la courbe de
calibration. Les résultats sont interprétés comme suit (–) absence de métastase,
(+) micrométastase, (++) macrométastase, (+)i positif par inhibition, nombre
de copies dans le lysat dilué supérieur au nombre de copies dans le lysat pur,
présence d’une métastase. Actuellement, des investigations sont en cours pour
améliorer l’interprétation des résultats par inhibition et des modifications dans
l’interprétation déjà validées par le fournisseur (tableau I).
Tableau I - Interprétation des résultats OSNA en fonction du nombre de copies d’ARNm CK19 dans
le lysat pur et dilué au 1/10.
Nbre de copies
ARNm CK19
/μl de
l lysat pur
Nbre de copies
ARNm CK19
/μl de lysat dilué
Résultat
qualitatif
RD-100i
Interprétation du résultat
< 250
< 250
(–)
Absence de métastase
> 250 et < 5 000
< 5 000
(+)
Micrométastase
> 5 000
quel que soit le
nombre
(++)
Macrométastase
< 250
> 250 et < 5 000
(+) i
En faveur d’une micrométastase
> 250 et < 5 000
> 5 000
(+) i
En faveur d’une macrométastase
< 250
> 5 000
(+) i
En faveur d’une macrométastase
Cellules grisées : modifications dans l’interprétation par rapport à la version initiale du
fournisseur suite à des études permettant de mieux quantifier en présence d’une inhibition.
OSNA et cancer du sein
La première étude publiée par une équipe japonaise a montré une concordance de 98,2 % entre l’analyse OSNA et l’analyse histologique pour la détection des métastases ganglionnaires de plus de 0,2 mm des cancers du sein [27].
Des études de validation ont été menées dans différents pays européens et au
Japon. Ces études ont confirmé la possibilité d’utiliser OSNA pour détecter les