solvants) contenant des extrémités OCH 2 Cl. L’étape 1 de la synthèse consiste à ?xer
d’abord l’acide aminé C-terminal (protégé sous forme N-Boc) à la résine. Le groupement protecteur N-Boc est ensuite enlevé (étape 2 ) par un traitement avec CF 3 COOH
pour générer l’acide carboxylique libre. À l’étape 3 , le second acide aminé (N-protégé)
est ajouté a?n de créer une liaison peptidique avec l’acide aminé déjà attaché sur la
résine. Un agent de couplage doit être utilisé, mais le DCC est inadéquat, puisque la
DCU formée est insoluble dans la majorité des solvants organiques et qu’elle peut dif?cilement être éliminée du support polymérique. Le diisopropylcarbodiimide (DIC)
est plutôt utilisé, puisque la diisopropylurée (DIU) formée est beaucoup plus soluble.
L’étape 4 est identique à l’étape 2 , soit l’enlèvement du groupement protecteur pour
générer l’acide libre. En?n, l’étape ?nale (étape 5 ) consiste à décrocher le peptide du
support polymérique par un traitement au HBr / CF 3 COOH.
De nos jours, ce processus est réalisé en continu à l’aide d’appareils programmables et complètement automatisés. Les acides aminés et les réactifs nécessaires pour
l’enlèvement des groupements protecteurs sont généralement utilisés en excès (jusqu’à
10 fois), ce qui permet de compléter chaque réaction avec des rendements supérieurs
à 99,5 %. Selon les groupements protecteurs utilisés, le temps de synthèse varie de 20
à 60 minutes par acide aminé. Cette technique a bien entendu ses limites et permet
la synthèse de peptides possédant jusqu’à une centaine d’acides aminés. En 1969,
Merri?eld utilisa cette technique pour synthétiser l’enzyme ribonucléase (contenant
124 acides aminés) en seulement six semaines !
Figure 6.43 Séquence des étapes de la synthèse peptidique sur phase solide (SPPS)
Exercice 6.12 Écrivez toutes les étapes chimiques pour la synthèse en phase
solide du tripeptide SerOGluOVal.
6.8 Préparation des peptides et des protéines
299
d’abord l’acide aminé C-terminal (protégé sous forme N-Boc) à la résine. Le groupement protecteur N-Boc est ensuite enlevé (étape 2 ) par un traitement avec CF 3 COOH
pour générer l’acide carboxylique libre. À l’étape 3 , le second acide aminé (N-protégé)
est ajouté a?n de créer une liaison peptidique avec l’acide aminé déjà attaché sur la
résine. Un agent de couplage doit être utilisé, mais le DCC est inadéquat, puisque la
DCU formée est insoluble dans la majorité des solvants organiques et qu’elle peut dif?cilement être éliminée du support polymérique. Le diisopropylcarbodiimide (DIC)
est plutôt utilisé, puisque la diisopropylurée (DIU) formée est beaucoup plus soluble.
L’étape 4 est identique à l’étape 2 , soit l’enlèvement du groupement protecteur pour
générer l’acide libre. En?n, l’étape ?nale (étape 5 ) consiste à décrocher le peptide du
support polymérique par un traitement au HBr / CF 3 COOH.
De nos jours, ce processus est réalisé en continu à l’aide d’appareils programmables et complètement automatisés. Les acides aminés et les réactifs nécessaires pour
l’enlèvement des groupements protecteurs sont généralement utilisés en excès (jusqu’à
10 fois), ce qui permet de compléter chaque réaction avec des rendements supérieurs
à 99,5 %. Selon les groupements protecteurs utilisés, le temps de synthèse varie de 20
à 60 minutes par acide aminé. Cette technique a bien entendu ses limites et permet
la synthèse de peptides possédant jusqu’à une centaine d’acides aminés. En 1969,
Merri?eld utilisa cette technique pour synthétiser l’enzyme ribonucléase (contenant
124 acides aminés) en seulement six semaines !
Figure 6.43 Séquence des étapes de la synthèse peptidique sur phase solide (SPPS)
Exercice 6.12 Écrivez toutes les étapes chimiques pour la synthèse en phase
solide du tripeptide SerOGluOVal.
6.8 Préparation des peptides et des protéines
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