et aucune migration n’est observée. L’acide aspartique est dans un milieu où le pH
est supérieur à son pI (2,98) et possède une charge effective moyenne négative : cet
acide aminé migre donc vers l’anode (positive). Enn, la lysine est dans un milieu où
le pH est inférieur à son pI (9,74) et possède une charge effective moyenne positive :
cet acide aminé migre donc vers la cathode (négative).
Un pH extrême est souvent utilisé pour les électrophorèses. Dans ces conditions, les
acides aminés sont appliqués à une extrémité de la plaque et non au centre. Lorsque la
séparation du même mélange est effectuée à pH 12, ces conditions font en sorte que tous
les acides aminés auront une charge négative (pH > pI) et migreront vers la borne positive (anode). Une séparation est obtenue, puisque la charge négative effective des trois
acides aminés est différente, cette charge étant d’autant plus importante que l’écart
entre le pH du milieu et le pI de l’acide aminé est grand. L’acide aspartique, dans ces
conditions, possède la charge négative la plus grande et migre donc plus rapidement
vers l’anode que la glycine, et encore plus rapidement que la lysine.
Exemple 6.4
Montrez la disposition des bandes pour la séparation par électrophorèse d’un
mélange d’alanine, d’acide glutamique, de tryptophane et d’arginine : a) à pH 5,00 ;
b) à pH 1,00.
Solution
À pH 5,00
Alanine : pH < pI (6,00), donc charge positive.
Acide glutamique : pH > pI (3,22), donc charge négative.
Tryptophane : pH < pI (5,89), donc charge positive, mais moins importante que pour
l’alanine.
Arginine : pH < pI (10,76), donc charge positive, mais plus importante que pour l’alanine.
À pH 1,00
Les quatre acides aminés présents sont à un pH inférieur à leur pI et ils ont donc tous une
charge effective moyenne positive en solution. Cependant, l’écart entre le pH et le pI est le
plus important pour l’arginine, suivie de l’alanine, du tryptophane et de l’acide glutamique.
Exercice 6.3 Cinq acides aminés ont été séparés par électrophorèse à pH 5,65.
Deux de ces acides aminés sont identiés sur le support ci-dessous, mais pas
les trois autres. Quels sont-ils ?
264 Chapitre 6 Protides
est supérieur à son pI (2,98) et possède une charge effective moyenne négative : cet
acide aminé migre donc vers l’anode (positive). Enn, la lysine est dans un milieu où
le pH est inférieur à son pI (9,74) et possède une charge effective moyenne positive :
cet acide aminé migre donc vers la cathode (négative).
Un pH extrême est souvent utilisé pour les électrophorèses. Dans ces conditions, les
acides aminés sont appliqués à une extrémité de la plaque et non au centre. Lorsque la
séparation du même mélange est effectuée à pH 12, ces conditions font en sorte que tous
les acides aminés auront une charge négative (pH > pI) et migreront vers la borne positive (anode). Une séparation est obtenue, puisque la charge négative effective des trois
acides aminés est différente, cette charge étant d’autant plus importante que l’écart
entre le pH du milieu et le pI de l’acide aminé est grand. L’acide aspartique, dans ces
conditions, possède la charge négative la plus grande et migre donc plus rapidement
vers l’anode que la glycine, et encore plus rapidement que la lysine.
Exemple 6.4
Montrez la disposition des bandes pour la séparation par électrophorèse d’un
mélange d’alanine, d’acide glutamique, de tryptophane et d’arginine : a) à pH 5,00 ;
b) à pH 1,00.
Solution
À pH 5,00
Alanine : pH < pI (6,00), donc charge positive.
Acide glutamique : pH > pI (3,22), donc charge négative.
Tryptophane : pH < pI (5,89), donc charge positive, mais moins importante que pour
l’alanine.
Arginine : pH < pI (10,76), donc charge positive, mais plus importante que pour l’alanine.
À pH 1,00
Les quatre acides aminés présents sont à un pH inférieur à leur pI et ils ont donc tous une
charge effective moyenne positive en solution. Cependant, l’écart entre le pH et le pI est le
plus important pour l’arginine, suivie de l’alanine, du tryptophane et de l’acide glutamique.
Exercice 6.3 Cinq acides aminés ont été séparés par électrophorèse à pH 5,65.
Deux de ces acides aminés sont identiés sur le support ci-dessous, mais pas
les trois autres. Quels sont-ils ?
264 Chapitre 6 Protides