Matériel et méthodes
38
Lecture :
La présence des salmonelles se traduit par l’apparition des colonies transparentes à centre noire.
Identification par galerie API 20E
Principe
Plusieurs types de tests sont utilisés dans les galeries Api : étude de la fermentation de
différents glucides, aux anogramme, recherche directe d'une enzyme. Chaque tubule est équipé
d'un substrat distinct sur lequel le micro-organisme en question va réagir. Ils contiennent une
suspension bactérienne préalablement calibrée. Pendant la période d'incubation, les réactions
se manifestent par des changements de couleur spontanés ou révélés par l'ajout de réactifs.
Mode opératoire
À l'aide d'une pipette, une suspension de la souche à étudier est préparée à partir d'une
colonie isolée sur un milieu gélosé, en utilisant 5 ml d'eau distillée stérile ou d'eau
physiologique. Ensuite, les cupules de la galerie sont remplies en veillant à éviter la formation
de bulles d'air.
Pour les substrats dont le sigle est encadré, il est nécessaire de remplir les cupules de
manière à créer un ménisque. En ce qui concerne les substrats dont le sigle est souligné, les
cupules doivent être remplies d'huile de vaseline pour créer une anaérobiose (absence
d'oxygène) ou pour maintenir en solution les ions volatils produits par la réaction, garantissant
ainsi le changement de couleur de l'indicateur de pH.
Les creux du support de la galerie doivent être remplis d'eau afin de former une chambre
humide. La galerie est ensuite placée dans le support, avec le couvercle par-dessus. L'ensemble
est incubé à une température appropriée pendant 24 à 48 h.
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Lecture :
La présence des salmonelles se traduit par l’apparition des colonies transparentes à centre noire.
Identification par galerie API 20E
Principe
Plusieurs types de tests sont utilisés dans les galeries Api : étude de la fermentation de
différents glucides, aux anogramme, recherche directe d'une enzyme. Chaque tubule est équipé
d'un substrat distinct sur lequel le micro-organisme en question va réagir. Ils contiennent une
suspension bactérienne préalablement calibrée. Pendant la période d'incubation, les réactions
se manifestent par des changements de couleur spontanés ou révélés par l'ajout de réactifs.
Mode opératoire
À l'aide d'une pipette, une suspension de la souche à étudier est préparée à partir d'une
colonie isolée sur un milieu gélosé, en utilisant 5 ml d'eau distillée stérile ou d'eau
physiologique. Ensuite, les cupules de la galerie sont remplies en veillant à éviter la formation
de bulles d'air.
Pour les substrats dont le sigle est encadré, il est nécessaire de remplir les cupules de
manière à créer un ménisque. En ce qui concerne les substrats dont le sigle est souligné, les
cupules doivent être remplies d'huile de vaseline pour créer une anaérobiose (absence
d'oxygène) ou pour maintenir en solution les ions volatils produits par la réaction, garantissant
ainsi le changement de couleur de l'indicateur de pH.
Les creux du support de la galerie doivent être remplis d'eau afin de former une chambre
humide. La galerie est ensuite placée dans le support, avec le couvercle par-dessus. L'ensemble
est incubé à une température appropriée pendant 24 à 48 h.
