Matériels et Méthodes
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5.2.3. Dénombrement des staphylocoques à coagulase positif :
Les staphylocoques constituent avec les microcoques les deux principaux genres de la
famille des Micrococcaceae. Ce sont des cocci à Gram positif, non sporulés, immobiles, se divisant
en plusieurs plans en formant des amas irréguliers. Ils produisent une catalase. Leur paroi est
principalement constituée de peptidoglycane. Staphylocoques à coagulase positive (SCP),
notamment Staphylococcus aureus, principal producteur d’entérotoxines pathogènes pour
l’homme, possède une enzyme, la coagulase qui permet de les identifier (BERAUD, 2014).
• Mode opératoire :
Chaque dilution ((10
-1
, 10
-2
, 10
-3
, 10
-4
) des échantillons préparés (M1, M2 et le blanc) est
ensemencée en surface avec 0,1 ml en utilisant une micropipette à cône stérile dans une boîte de
Pétri stérile contenant de la gélose Chapman bien solidifiée ; ensuite, l'incubation est effectuée à
37°C pendant 24 heures.
• Lecture :
Les Staphylocoques pathogènes forment des colonies luxuriantes, pigmentées, entourées
d’une auréole jaune due à la fermentation du mannitol.
• Test de coagulase :
Le test de la coagulase différencie les souches de Staphylococcus aureus des autres espèces
à coagulase négative. La coagulase est une protéine semblable à une enzyme qui provoque la
coagulation du plasma en convertissant le fibrinogène en fibrine.
Figure 37: Étapes pour la recherche des staphylocoques à coagulase positif (JOFFIN Christiane,
2010)
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5.2.3. Dénombrement des staphylocoques à coagulase positif :
Les staphylocoques constituent avec les microcoques les deux principaux genres de la
famille des Micrococcaceae. Ce sont des cocci à Gram positif, non sporulés, immobiles, se divisant
en plusieurs plans en formant des amas irréguliers. Ils produisent une catalase. Leur paroi est
principalement constituée de peptidoglycane. Staphylocoques à coagulase positive (SCP),
notamment Staphylococcus aureus, principal producteur d’entérotoxines pathogènes pour
l’homme, possède une enzyme, la coagulase qui permet de les identifier (BERAUD, 2014).
• Mode opératoire :
Chaque dilution ((10
-1
, 10
-2
, 10
-3
, 10
-4
) des échantillons préparés (M1, M2 et le blanc) est
ensemencée en surface avec 0,1 ml en utilisant une micropipette à cône stérile dans une boîte de
Pétri stérile contenant de la gélose Chapman bien solidifiée ; ensuite, l'incubation est effectuée à
37°C pendant 24 heures.
• Lecture :
Les Staphylocoques pathogènes forment des colonies luxuriantes, pigmentées, entourées
d’une auréole jaune due à la fermentation du mannitol.
• Test de coagulase :
Le test de la coagulase différencie les souches de Staphylococcus aureus des autres espèces
à coagulase négative. La coagulase est une protéine semblable à une enzyme qui provoque la
coagulation du plasma en convertissant le fibrinogène en fibrine.
Figure 37: Étapes pour la recherche des staphylocoques à coagulase positif (JOFFIN Christiane,
2010)