31
3.3.5 Comptage cellulaire
Le comptage cellulaire des microalgues a deux objectifs principaux : calculer la taille de la
population cultivée qui peut être exprimée en nombre total de cellules par unité de volume de
culture, et évaluer le taux de croissance de la culture qui est égal au taux d’augmentation de la
population (Figure 3-6). Pour cela nous avons utilisés microscope optique (OPTIKA,
microscope Italie,) avec des objectifs 10X et 40 X, un flacon en plastique de 80 % de
l'éthanol, un hémacytomètre, une lame, une lamelle, ainsi que des Micropipettes. L’éthanol a
été utilisé pour fixer la lamelle sur le dessus des lames de comptage.
Figure 3-5 : Cellule de Malassez
La micropipette de 20 à 200 µL a été utilisée pour remplir le compartiment de la chambre de
comptage, tandis que la micropipette de 1 000 µL était utilisée pour homogénéiser
l'échantillon. L'hémacytomètre utilisé dans cette expérience était doté d'une chambre de 0,1
mm de profondeur (Figure.2.6). Il comporte deux chambres et chaque chambre comporte neuf
carrés de 1 mm. La chambre a plusieurs couches de division qui sont des carrés de 250 µm,
des rectangles de 250 × 200 µm, des carrés de 200 µm et des carrés de 50 µm carrés. Le
volume d'un carré de 1 mm est de 0,0001 mL. Après avoir nettoyé la chambre de comptage
avec de l’eau distillée et de l’éthanol un volume de suspension microalgale était injecté à
l’aide d’une micropipette tout en assurant un remplissage total en une seule fois, sans bulles
d’air, et sans déborder le liquide dans les rigoles. Ensuite l’hémacytomètre remplis avec
l’échantillon est disposé sous le microscope. Les cellules doivent se sédimenter sur le
quadrillage pendant quelques minutes avant de passer à la numération (Faurie).
3.3.5.1 Taux de croissance(µ) et temps de doublement (dt)
Le taux de croissance spécifique (µ) et le temps de doublement ont été calculés à l'aide de
l'équation. (1) et (2), basés sur les paramètres de début et de fin de la phase de croissance (de
Godos et al).
3.3.5 Comptage cellulaire
Le comptage cellulaire des microalgues a deux objectifs principaux : calculer la taille de la
population cultivée qui peut être exprimée en nombre total de cellules par unité de volume de
culture, et évaluer le taux de croissance de la culture qui est égal au taux d’augmentation de la
population (Figure 3-6). Pour cela nous avons utilisés microscope optique (OPTIKA,
microscope Italie,) avec des objectifs 10X et 40 X, un flacon en plastique de 80 % de
l'éthanol, un hémacytomètre, une lame, une lamelle, ainsi que des Micropipettes. L’éthanol a
été utilisé pour fixer la lamelle sur le dessus des lames de comptage.
Figure 3-5 : Cellule de Malassez
La micropipette de 20 à 200 µL a été utilisée pour remplir le compartiment de la chambre de
comptage, tandis que la micropipette de 1 000 µL était utilisée pour homogénéiser
l'échantillon. L'hémacytomètre utilisé dans cette expérience était doté d'une chambre de 0,1
mm de profondeur (Figure.2.6). Il comporte deux chambres et chaque chambre comporte neuf
carrés de 1 mm. La chambre a plusieurs couches de division qui sont des carrés de 250 µm,
des rectangles de 250 × 200 µm, des carrés de 200 µm et des carrés de 50 µm carrés. Le
volume d'un carré de 1 mm est de 0,0001 mL. Après avoir nettoyé la chambre de comptage
avec de l’eau distillée et de l’éthanol un volume de suspension microalgale était injecté à
l’aide d’une micropipette tout en assurant un remplissage total en une seule fois, sans bulles
d’air, et sans déborder le liquide dans les rigoles. Ensuite l’hémacytomètre remplis avec
l’échantillon est disposé sous le microscope. Les cellules doivent se sédimenter sur le
quadrillage pendant quelques minutes avant de passer à la numération (Faurie).
3.3.5.1 Taux de croissance(µ) et temps de doublement (dt)
Le taux de croissance spécifique (µ) et le temps de doublement ont été calculés à l'aide de
l'équation. (1) et (2), basés sur les paramètres de début et de fin de la phase de croissance (de
Godos et al).