Matériel et méthodes
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Zi = diamètre de la zone d’inhibition obtenue – diamètre du puits (6mm)
II-10 Conservation des souches
La conservation des souches identifiées a été réalisée à -20°C dans un bouillon cœur cervelle
(BHIB) additionné avec du glycérol (volume / volume).
Le milieu MRS
Incuber 37°C
pendant 24h
Centrifugé à (4000
tr/min, 15min) et le
surnageant est
neutralisé et
conservé à 4°C.
Bactéries pathogènes (E. coli)
incubées 18h à 24h à 37°C
Ces puits
recevront 100
μl du
surnageant
brut
Müller Hinton solide et
Ensemencé par la souche
test des puits sont réalisé
Les puits entourés
d'une zone sont
considérées comme
positive
Zi
Figure 45 : Schéma de la méthode de diffusion en puits : production de bactériocines
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Caractérisation et évaluation de la virulence et de la résistance aux antibiotiques chez les entérocoques isolés dans le milieu marin - 76/154

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