Matériel et méthodes
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Dans notre école, nous ne disposions pas des réactifs nécessaires pour la galerie 20 Strept. Par
conséquent, nous avons effectué l'identification des souches à l'Institut Pasteur, où nous avons
été autorisées à identifier seulement 16 souches parmi les 43 disponibles. Nous les avons
sélectionnées en fonction de leurs profils des tests déjà effectuées.
Mode opératoire
Réunir fond et couvercle d'une boîte d'incubation et répartir environ 5 ml d'eau distillée
dans les alvéoles pour créer une atmosphère humide.
Inscrire la référence de la souche sur la languette latérale de la boîte.
Placer la galerie dans la boîte d'incubation.
Préparer la suspension bactérienne, en introduisant 2 à 3 colonies dans 2 ml d’eau
physiologique stérile puis agiter avec un vortex.
Dans la première moitié de la galerie (tests VP à ADH), répartir la suspension
précédente en évitant la formation de bulles (pour cela, incliner la boîte d'incubation
vers l'avant et placer la pointe de la micropipette sur le côté de la cupule) :
Pour les tests VP à LAP : environ 100 μl dans chaque cupule.
Pour le test ADH : remplir uniquement le tube.
Dans la deuxième moitié de la galerie (tests Rib à Glyg) :
Ouvrir une ampoule d'api GP Medium et y transférer le reste de la suspension, soit 0,5 ml au
minimum. Bien homogénéiser.
Répartir cette nouvelle suspension dans les cupules qui reste (Rib à Glyg).
Remplir les cupules des tests soulignés ADH à Glyg avec de l'huile de paraffine en
formant un ménisque convexe.
Refermer la boîte d'incubation et incuber à 37°C pendant 24 h.
Après 24 heures d'incubation : Ajouter les réactifs :
Figure 39 : Le système de la galerie Api 20 Strept
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Dans notre école, nous ne disposions pas des réactifs nécessaires pour la galerie 20 Strept. Par
conséquent, nous avons effectué l'identification des souches à l'Institut Pasteur, où nous avons
été autorisées à identifier seulement 16 souches parmi les 43 disponibles. Nous les avons
sélectionnées en fonction de leurs profils des tests déjà effectuées.
Mode opératoire
Réunir fond et couvercle d'une boîte d'incubation et répartir environ 5 ml d'eau distillée
dans les alvéoles pour créer une atmosphère humide.
Inscrire la référence de la souche sur la languette latérale de la boîte.
Placer la galerie dans la boîte d'incubation.
Préparer la suspension bactérienne, en introduisant 2 à 3 colonies dans 2 ml d’eau
physiologique stérile puis agiter avec un vortex.
Dans la première moitié de la galerie (tests VP à ADH), répartir la suspension
précédente en évitant la formation de bulles (pour cela, incliner la boîte d'incubation
vers l'avant et placer la pointe de la micropipette sur le côté de la cupule) :
Pour les tests VP à LAP : environ 100 μl dans chaque cupule.
Pour le test ADH : remplir uniquement le tube.
Dans la deuxième moitié de la galerie (tests Rib à Glyg) :
Ouvrir une ampoule d'api GP Medium et y transférer le reste de la suspension, soit 0,5 ml au
minimum. Bien homogénéiser.
Répartir cette nouvelle suspension dans les cupules qui reste (Rib à Glyg).
Remplir les cupules des tests soulignés ADH à Glyg avec de l'huile de paraffine en
formant un ménisque convexe.
Refermer la boîte d'incubation et incuber à 37°C pendant 24 h.
Après 24 heures d'incubation : Ajouter les réactifs :
Figure 39 : Le système de la galerie Api 20 Strept
