Matériel et méthodes
50
-Observer la lame sous un microscope avec un grossissement initial de l'objectif 40, puis
augmenter le grossissement à x100 après l’ajout d’une goutte d'huile à immersion.
Les bactéries à Gram positif se colorent en violet, et celles à Gram négatif se colorent en rose.
II-6- 2 Les tests Biochimiques pour l’identification des entérocoques
a) Test de la catalase
Le test de la catalase est une méthode couramment utilisée en microbiologie pour détecter la
présence de l'enzyme catalase dans les bactéries. L'enzyme catalase catalyse la décomposition
du peroxyde d'hydrogène en eau et en oxygène.
2 H2O2 → 2 H2O + O2 (Vezina et Lacroix, 2000).
La formation immédiate de bulles d'oxygène après l'application du peroxyde d'hydrogène sur
la culture bactérienne indique une réaction catalase positive, tandis que l'absence de formation
de bulles suggère une réaction catalase négative.
Mode opératoire
 Déposer une goutte d'eau oxygénée (peroxyde d'hydrogène) à 3 % sur une lame propre
 Transférer 2 à 3 colonies dans la goutte d'eau oxygénée.
 Observer immédiatement la zone où la suspension bactérienne a été ajoutée à l'eau
oxygénée.
Figure 34 : Schéma représentatif de la coloration de Gram (Microbiologie-clinique.
Coloration-Gram.2023)