Matériel et méthodes
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indicateur clé pour évaluer la résistance aux antibiotiques dans une communauté ou un
environnement spécifique. Elle permet d'orienter les politiques de santé publique et les
programmes de lutte contre la résistance aux antibiotiques en identifiant les souches
bactériennes les plus préoccupantes et en mettant en place des mesures de prévention et de
contrôle appropriées.
L’évaluation des taux de résistance aux antibiotiques des entérocoques a été effectuée par la
filtration de 100ml d’échantillon ou de dilution et l’incubation des membranes sur milieu
Slanetz et Bartley additionné ou non des antibiotiques suivants à une concentration critique : la
Vancomycine (4µg/ml), la Gentamicine (0,5µg/ml), l’Ampicilline (8µg/ml), la Tétracycline
(5µg/ml), la Ciprofloxacine (80µg/ml) et l’Azithromycine (0,01g/ml).
L’incubation du milieu est effectuée à 37°C pendant 24-48h.
Après 24 heures d’incubation à 37°C, les entérocoques apparaissent sous forme de petites
colonies rouges ou roses, lisses, légèrement bombées. La confirmation de ces colonies se fait
sur gélose BEA additionnée ou non du même antibiotique pendant 2h. Les entérocoques
apparaissent noirs.
Calcul du taux de résistance
La prévalence est exprimée par un ratio et a été calculée en divisant le nombre de bactéries
obtenues sur le milieu gélosé BEA contenant des antibiotiques par le nombre de bactéries
obtenues sur le milieu sans antibiotique.
II-5- Isolement :
Pour obtenir des cultures pures, des isolements ont été réalisées en prenant une colonie
préalablement confirmée sur BEA (colonies noires) et en l’ensemençant sur milieu Slanetz.
Cette opération a été répétée plusieurs fois jusqu'à l'obtention d'une culture pure.
Prévalence (%) =
Nombre de bactéries sur milieu avec antibiotique
Nombre de bactéries sur un milieu sans antibiotique
* 100
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indicateur clé pour évaluer la résistance aux antibiotiques dans une communauté ou un
environnement spécifique. Elle permet d'orienter les politiques de santé publique et les
programmes de lutte contre la résistance aux antibiotiques en identifiant les souches
bactériennes les plus préoccupantes et en mettant en place des mesures de prévention et de
contrôle appropriées.
L’évaluation des taux de résistance aux antibiotiques des entérocoques a été effectuée par la
filtration de 100ml d’échantillon ou de dilution et l’incubation des membranes sur milieu
Slanetz et Bartley additionné ou non des antibiotiques suivants à une concentration critique : la
Vancomycine (4µg/ml), la Gentamicine (0,5µg/ml), l’Ampicilline (8µg/ml), la Tétracycline
(5µg/ml), la Ciprofloxacine (80µg/ml) et l’Azithromycine (0,01g/ml).
L’incubation du milieu est effectuée à 37°C pendant 24-48h.
Après 24 heures d’incubation à 37°C, les entérocoques apparaissent sous forme de petites
colonies rouges ou roses, lisses, légèrement bombées. La confirmation de ces colonies se fait
sur gélose BEA additionnée ou non du même antibiotique pendant 2h. Les entérocoques
apparaissent noirs.
Calcul du taux de résistance
La prévalence est exprimée par un ratio et a été calculée en divisant le nombre de bactéries
obtenues sur le milieu gélosé BEA contenant des antibiotiques par le nombre de bactéries
obtenues sur le milieu sans antibiotique.
II-5- Isolement :
Pour obtenir des cultures pures, des isolements ont été réalisées en prenant une colonie
préalablement confirmée sur BEA (colonies noires) et en l’ensemençant sur milieu Slanetz.
Cette opération a été répétée plusieurs fois jusqu'à l'obtention d'une culture pure.
Prévalence (%) =
Nombre de bactéries sur milieu avec antibiotique
Nombre de bactéries sur un milieu sans antibiotique
* 100