Matériel et méthodes
43
II-2- Collecte des échantillons
La collecte des échantillons d’eau de mer au niveau des 6 sites, est effectuée à une profondeur
de 20 cm et à une distance de 1 mètre du bord de mer.
Les échantillons sont transportés avec soin pour garantir l'absence de contamination et assurer
la précision des analyses. Des flacons stériles d'1 litre sont utilisés et maintenus dans la main
près du point de prélèvement avant d'être plongés dans l'eau. Les bouchons sont ouverts sous la
surface de l’eau pour éviter toute contamination atmosphérique.
Les sédiments ont été prélevés dans des sachets de congélation stériles afin de prévenir toute
contamination.
Chaque échantillon a été soigneusement étiqueté avec la date, l'heure et le site de prélèvement
pour assurer une identification précise.
Après la collecte, tous les échantillons ont été acheminés vers le laboratoire dans une glacière
et les analyses ont été effectuées peu de temps après le prélèvement, assurant ainsi la qualité
des résultats.
II-3-Analyse Microbiologique des Échantillons
II-3-1 Dénombrement des coliformes fécaux et totaux dans l’eau de mer par la méthode
de filtration
La méthode de filtration est une approche largement adoptée pour l'évaluation de la qualité
microbiologique de l'eau. Elle se caractérise par la filtration d'un volume déterminé,
généralement 100 ml, de l'échantillon à travers une membrane filtrante stérile dont les pores ont
un diamètre de 0,45 micromètre. Ce processus est effectué au sein d'une rampe de filtration en
acier inoxydable, comprenant de 4 à 6 postes, dans des conditions stériles (Rodier et al. 2009).
Une fois la filtration terminée, la membrane filtrante est délicatement déposée à la surface d'un
milieu de culture approprié.
Mode opératoire
Pour chaque échantillon d'eau de mer prélevé à partir des 6 sites, procéder à des dilutions
successives jusqu'à obtenir une dilution finale de 10
-3 et un volume total de 100 ml pour chaque
dilution.
Filtrer chaque dilution à travers une membrane filtrante de 0,45µm.
Déposer les membranes filtrantes sur le milieu solide Tergitol dans des boîtes de Pétri.
43
II-2- Collecte des échantillons
La collecte des échantillons d’eau de mer au niveau des 6 sites, est effectuée à une profondeur
de 20 cm et à une distance de 1 mètre du bord de mer.
Les échantillons sont transportés avec soin pour garantir l'absence de contamination et assurer
la précision des analyses. Des flacons stériles d'1 litre sont utilisés et maintenus dans la main
près du point de prélèvement avant d'être plongés dans l'eau. Les bouchons sont ouverts sous la
surface de l’eau pour éviter toute contamination atmosphérique.
Les sédiments ont été prélevés dans des sachets de congélation stériles afin de prévenir toute
contamination.
Chaque échantillon a été soigneusement étiqueté avec la date, l'heure et le site de prélèvement
pour assurer une identification précise.
Après la collecte, tous les échantillons ont été acheminés vers le laboratoire dans une glacière
et les analyses ont été effectuées peu de temps après le prélèvement, assurant ainsi la qualité
des résultats.
II-3-Analyse Microbiologique des Échantillons
II-3-1 Dénombrement des coliformes fécaux et totaux dans l’eau de mer par la méthode
de filtration
La méthode de filtration est une approche largement adoptée pour l'évaluation de la qualité
microbiologique de l'eau. Elle se caractérise par la filtration d'un volume déterminé,
généralement 100 ml, de l'échantillon à travers une membrane filtrante stérile dont les pores ont
un diamètre de 0,45 micromètre. Ce processus est effectué au sein d'une rampe de filtration en
acier inoxydable, comprenant de 4 à 6 postes, dans des conditions stériles (Rodier et al. 2009).
Une fois la filtration terminée, la membrane filtrante est délicatement déposée à la surface d'un
milieu de culture approprié.
Mode opératoire
Pour chaque échantillon d'eau de mer prélevé à partir des 6 sites, procéder à des dilutions
successives jusqu'à obtenir une dilution finale de 10
-3 et un volume total de 100 ml pour chaque
dilution.
Filtrer chaque dilution à travers une membrane filtrante de 0,45µm.
Déposer les membranes filtrantes sur le milieu solide Tergitol dans des boîtes de Pétri.