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d’ammoniaque concentré à 28% en masse. Après plusieurs cycles de lavages/centrifugations
jusqu’à l’obtention d’un pH neutre, le chitosane est lyophilisé. Le produit obtenu est un chitosane
de bas DA (1.5%) et de haute masse moléculaire (Mw proche de 500 000 g.mol−1 +/−50 000
g.mol−1) dont la teneur en eau est d’environ 9% w/w +/− 1 %. Destinés à être implantés sur des
plaies chirurgicales, les hydrogels de chitosane doivent être soumis à un traitement stérilisant. Les
principaux procédés de stérilisation employés pour les dispositifs médicaux et pharmaceutiques
sont la chaleur sèche, la vapeur d’eau, l’oxyde d’éthylène et le rayonnement gamma ont montré
que la stérilisation par chaleur sèche diminue la solubilité du chitosane, phénomène également
observé après une stérilisation à la vapeur, et accompagné dans ce dernier cas d’une chute
importante des propriétés mécaniques des membranes de chitosane testées. Par ailleurs Lim et coll.
ont conclu à la suite d’une autre étude que les rayons gamma, en dépit d’un grand nombre de
ruptures de chaînes polymères et d’une importante dégradation des propriétés mécaniques,
constitue le meilleur procédé de stérilisation pour le chitosane[34]. Ces conclusions sont en
contradiction avec celles de Rao et coll. et celles de Jarry et coll. qui préconisent la méthode de
stérilisation à la vapeur d’eau.
Plusieurs auteurs décrivent un jaunissement du chitosane lors de stérilisation à la vapeur ou aux
rayons gamma [35].
1.29.2. Procédé de fabrication des hydrogels bicouches
Une solution aqueuse de chitosane concentrée à 3% en masse est préparée sous la hotte à flux
laminaire à partir du chitosane précédemment purifié et stérilisé, d’eau permutée stérile et de la
quantité d’acide chlorhydrique (37% en masse) nécessaire pour atteindre la protonation de tous les
sites −NH2. La dissolution est complète après 8 heures sous agitation. On obtient alors une solution
hydroalcoolique de chitosane en ajoutant du 1,2− propanediol à cette solution aqueuse, avec un
ratio 1/1. Lorsque la solution hydroalcoolique est homogène, celle−ci est versée dans une boite de
Pétri puis placée à l’étuve à 50˚C. Après environ 48h, l’eau contenue dans le mélange est
complètement évaporée (ce qui correspond à une chute de masse de 50%), et on obtient alors un
gel alcoolique.
La seconde couche du système est obtenue par l’ajout sur ce gel alcoolique d’une solution aqueuse
de chitosane (3% en masse), obtenue comme précédemment par dissolution du chitosane dans une
solution aqueuse d’acide chlorhydrique.[19].
Finalement on place la boite de pétri contenant les deux couches dans une atmosphère chargée en
vapeur d’ammoniac, capable de diffuser à travers la solution d’une part et l'alcogel d’autre part.
d’ammoniaque concentré à 28% en masse. Après plusieurs cycles de lavages/centrifugations
jusqu’à l’obtention d’un pH neutre, le chitosane est lyophilisé. Le produit obtenu est un chitosane
de bas DA (1.5%) et de haute masse moléculaire (Mw proche de 500 000 g.mol−1 +/−50 000
g.mol−1) dont la teneur en eau est d’environ 9% w/w +/− 1 %. Destinés à être implantés sur des
plaies chirurgicales, les hydrogels de chitosane doivent être soumis à un traitement stérilisant. Les
principaux procédés de stérilisation employés pour les dispositifs médicaux et pharmaceutiques
sont la chaleur sèche, la vapeur d’eau, l’oxyde d’éthylène et le rayonnement gamma ont montré
que la stérilisation par chaleur sèche diminue la solubilité du chitosane, phénomène également
observé après une stérilisation à la vapeur, et accompagné dans ce dernier cas d’une chute
importante des propriétés mécaniques des membranes de chitosane testées. Par ailleurs Lim et coll.
ont conclu à la suite d’une autre étude que les rayons gamma, en dépit d’un grand nombre de
ruptures de chaînes polymères et d’une importante dégradation des propriétés mécaniques,
constitue le meilleur procédé de stérilisation pour le chitosane[34]. Ces conclusions sont en
contradiction avec celles de Rao et coll. et celles de Jarry et coll. qui préconisent la méthode de
stérilisation à la vapeur d’eau.
Plusieurs auteurs décrivent un jaunissement du chitosane lors de stérilisation à la vapeur ou aux
rayons gamma [35].
1.29.2. Procédé de fabrication des hydrogels bicouches
Une solution aqueuse de chitosane concentrée à 3% en masse est préparée sous la hotte à flux
laminaire à partir du chitosane précédemment purifié et stérilisé, d’eau permutée stérile et de la
quantité d’acide chlorhydrique (37% en masse) nécessaire pour atteindre la protonation de tous les
sites −NH2. La dissolution est complète après 8 heures sous agitation. On obtient alors une solution
hydroalcoolique de chitosane en ajoutant du 1,2− propanediol à cette solution aqueuse, avec un
ratio 1/1. Lorsque la solution hydroalcoolique est homogène, celle−ci est versée dans une boite de
Pétri puis placée à l’étuve à 50˚C. Après environ 48h, l’eau contenue dans le mélange est
complètement évaporée (ce qui correspond à une chute de masse de 50%), et on obtient alors un
gel alcoolique.
La seconde couche du système est obtenue par l’ajout sur ce gel alcoolique d’une solution aqueuse
de chitosane (3% en masse), obtenue comme précédemment par dissolution du chitosane dans une
solution aqueuse d’acide chlorhydrique.[19].
Finalement on place la boite de pétri contenant les deux couches dans une atmosphère chargée en
vapeur d’ammoniac, capable de diffuser à travers la solution d’une part et l'alcogel d’autre part.