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crucial pour éviter la contamination des échantillons (CCME, 2011), ce nettoyage est
particulièrement important lorsqu'on mesure des substances en très petites quantités
tels que les métaux. Ceci permet d'enlever les résidus de fabrication de l'équipement
neuf et de se débarrasser de la poussière et des débris sur l'équipement qui a été
entreposé ou transporté pendant longtemps. Les échantillons prévus ont été prélevés
dans des flacons en verres de capacités de 1 litre. Fermer hermétiquement toutes les
bouteilles à l’aide de leur bouchon, et les placer en position verticale dans la glacière
pour la durée du transport, et par la suite ils ont été acheminés au laboratoire et ont été
conservés à +4°C.
L’isolement an été réalisé immédiatement une fois les échantillons arrivés aux
laboratoires après le prélèvement.
II.3.4 L’isolement et l’identification des bactéries
L’isolement permet d’obtenir les cultures pures indispensables à toute étude et
identification bactériologique (Marchal et al., 1991), Le but de l’isolement
bactériologique est d’obtenir des souches pures des bactéries résistantes aux métaux
lourds des eaux polluées. Ensuite de les identifier et de réaliser des essais de leur
croissance en présence de différentes gammes de concentration des différents métaux.
II.3.4.1 La technique d’isolement
- La préparation des solutions filles de dilution décimale à partir des
échantillons : un volume de 90 ml d'eau distillée a été ajouté dans des flacons
stérilisés dans un autoclave. Ensuite, 10 ml de la solution mère, c’est-à-dire
l’échantillon initial, ont été incorporés (Fig.13). Cette opération permet d'obtenir une
dilution décimale de10
−1
. Selon le même principe, une seconde dilution de 10
−2
a été
réalisée. Cette étape a été réalisée pour chaque échantillon (C.Delarras,2007) .
Figure 13 : Schéma de la préparation de solutions filles de dilution
crucial pour éviter la contamination des échantillons (CCME, 2011), ce nettoyage est
particulièrement important lorsqu'on mesure des substances en très petites quantités
tels que les métaux. Ceci permet d'enlever les résidus de fabrication de l'équipement
neuf et de se débarrasser de la poussière et des débris sur l'équipement qui a été
entreposé ou transporté pendant longtemps. Les échantillons prévus ont été prélevés
dans des flacons en verres de capacités de 1 litre. Fermer hermétiquement toutes les
bouteilles à l’aide de leur bouchon, et les placer en position verticale dans la glacière
pour la durée du transport, et par la suite ils ont été acheminés au laboratoire et ont été
conservés à +4°C.
L’isolement an été réalisé immédiatement une fois les échantillons arrivés aux
laboratoires après le prélèvement.
II.3.4 L’isolement et l’identification des bactéries
L’isolement permet d’obtenir les cultures pures indispensables à toute étude et
identification bactériologique (Marchal et al., 1991), Le but de l’isolement
bactériologique est d’obtenir des souches pures des bactéries résistantes aux métaux
lourds des eaux polluées. Ensuite de les identifier et de réaliser des essais de leur
croissance en présence de différentes gammes de concentration des différents métaux.
II.3.4.1 La technique d’isolement
- La préparation des solutions filles de dilution décimale à partir des
échantillons : un volume de 90 ml d'eau distillée a été ajouté dans des flacons
stérilisés dans un autoclave. Ensuite, 10 ml de la solution mère, c’est-à-dire
l’échantillon initial, ont été incorporés (Fig.13). Cette opération permet d'obtenir une
dilution décimale de10
−1
. Selon le même principe, une seconde dilution de 10
−2
a été
réalisée. Cette étape a été réalisée pour chaque échantillon (C.Delarras,2007) .
Figure 13 : Schéma de la préparation de solutions filles de dilution