II Matériel et Méthodes
19
II.1 Matériel . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
II.2 Site d’étude et d’échantillonnage . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
II.2.1 Oued El Harrach . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
II.2.2 Oued El Hamiz . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
II.3 Évaluation de la qualité bactériologique des échantillons d’eau . . . . . . . . . . . 22
II.3.1 Mode opératoire . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
II.3.2 Dénombrement de la flore mésophile aérobie totale . . . . . . . . . . . . . 22
II.3.3 Dénombrement des coliformes totaux . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
II.3.4 Dénombrement des coliformes fécaux ou thérmotolérants . . . . . . . . . 23
II.3.5 Dénombrement des Entérocoques (ex streptocoques fécaux) . . . . . . . . 23
II.4 Évaluation de la résistance bactérienne aux métaux lourds . . . . . . . . . . . . . . 25
II.5 Purification et conservation des souches résistantes aux métaux lourds . . . . . . . 25
II.5.1 Identification et caractérisation des bactéries résistantes . . . . . . . . . . . 26
II.5.1.1 La coloration de GRAM . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26
II.5.1.2 Identification biochimique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27
II.5.1.3 Identification des cocci à Gram positif . . . . . . . . . . . . . . 30
II.6 Détermination du profil de résistance aux métaux lourds des souches bactériennes
isolées par la méthode de dilution en milieu gélosé . . . . . . . . . . . . . . . . . 31
II.7 Étude de la résistance associée des bactéries aux antibiotiques . . . . . . . . . . . 31
II.7.1 Technique de l’antibiogramme . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32
II.8 Essaie d’élimination du chrome par des souches résistantes aux métaux lourds
(Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae ) . . . . 32
II.8.1 Expérimentation réalisée . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 33
II.8.2 Dosage du Chrome VI par la méthode colorimétrique . . . . . . . . . . . 33
III Résultats & Discussion
35
III.1 Qualité bactériologique des échantillons d’eau prélevés . . . . . . . . . . . . . . . 35
III.2 Prévalence de la résistance bactérienne aux métaux lourds . . . . . . . . . . . . . 37
III.3 Identification et caractérisation des souches résistantes . . . . . . . . . . . . . . . 38
III.3.1 Résultats de la coloration de Gram . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38
III.3.2 Résultats de l’identification des bactéries Gram- par Galerie API20E . . . 40
III.3.2.1 Résultats de l’identification des Gram+ . . . . . . . . . . . . . 43
III.4 Détermination du profil de résistance des bactéries aux métaux lourds . . . . . . . 45
III.5 Profil de résistance associée aux antibiotiques des souches résistantes aux métaux
lourds . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 48
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II.1 Matériel . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
II.2 Site d’étude et d’échantillonnage . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
II.2.1 Oued El Harrach . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
II.2.2 Oued El Hamiz . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
II.3 Évaluation de la qualité bactériologique des échantillons d’eau . . . . . . . . . . . 22
II.3.1 Mode opératoire . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
II.3.2 Dénombrement de la flore mésophile aérobie totale . . . . . . . . . . . . . 22
II.3.3 Dénombrement des coliformes totaux . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
II.3.4 Dénombrement des coliformes fécaux ou thérmotolérants . . . . . . . . . 23
II.3.5 Dénombrement des Entérocoques (ex streptocoques fécaux) . . . . . . . . 23
II.4 Évaluation de la résistance bactérienne aux métaux lourds . . . . . . . . . . . . . . 25
II.5 Purification et conservation des souches résistantes aux métaux lourds . . . . . . . 25
II.5.1 Identification et caractérisation des bactéries résistantes . . . . . . . . . . . 26
II.5.1.1 La coloration de GRAM . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26
II.5.1.2 Identification biochimique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27
II.5.1.3 Identification des cocci à Gram positif . . . . . . . . . . . . . . 30
II.6 Détermination du profil de résistance aux métaux lourds des souches bactériennes
isolées par la méthode de dilution en milieu gélosé . . . . . . . . . . . . . . . . . 31
II.7 Étude de la résistance associée des bactéries aux antibiotiques . . . . . . . . . . . 31
II.7.1 Technique de l’antibiogramme . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32
II.8 Essaie d’élimination du chrome par des souches résistantes aux métaux lourds
(Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae ) . . . . 32
II.8.1 Expérimentation réalisée . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 33
II.8.2 Dosage du Chrome VI par la méthode colorimétrique . . . . . . . . . . . 33
III Résultats & Discussion
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III.1 Qualité bactériologique des échantillons d’eau prélevés . . . . . . . . . . . . . . . 35
III.2 Prévalence de la résistance bactérienne aux métaux lourds . . . . . . . . . . . . . 37
III.3 Identification et caractérisation des souches résistantes . . . . . . . . . . . . . . . 38
III.3.1 Résultats de la coloration de Gram . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38
III.3.2 Résultats de l’identification des bactéries Gram- par Galerie API20E . . . 40
III.3.2.1 Résultats de l’identification des Gram+ . . . . . . . . . . . . . 43
III.4 Détermination du profil de résistance des bactéries aux métaux lourds . . . . . . . 45
III.5 Profil de résistance associée aux antibiotiques des souches résistantes aux métaux
lourds . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 48