CHAPITRE II
Matériel & Méthodes
l’antibiogramme de la Société Française de Microbiologie (CA-SFM, 2023).
II.7.1 Technique de l’antibiogramme
Une suspension bactérienne de la souche à tester (10
8 UFC/ml) a été préparée à partir d’une culture
jeune de 24h incubée à 37°C. Cette suspension a été ensuite ensemencée de manière uniforme sur
la surface d’une gélose Mueller-Hinton (MH) à l’aide d’un écouvillon stérile. Les disques d’antibiotiques ont été déposés sur la surface de cette gélose à l’aide d’une pince stérile. Les boîtes
ont ensuite été laissées à température ambiante pendant 15 minutes pour permettre la diffusion des
antibiotiques dans le milieu gélosé avant d’être incubées à 37°C pendant 18 à 24 heures.
Lecture Conformément aux recommandations du Comité de l’Antibiogramme de la Société Française de Microbiologie (CA-SFM, 2023), les diamètres des zones d’inhibition formées autour des
disques d’antibiotiques ont été mesurés en millimètres à l’aide d’un pied à coulisse. Ces valeurs
ont ensuite été comparées aux diamètres critiques fournis par le CA-SFM afin de déterminer la
sensibilité de la souche bactérienne testée aux différents antibiotiques.
le TABLEAU II.3 présente les différents antibiotiques qui ont été sélectionnés pour évaluer la sensibilité des espèces bactériennes étudiées.
TABLEAU II.3 – Les différents antibiotiques testés
Antibiotique
Charge(μg) Famille d’antibiotique
Ampicilline (AM)
10
Bêta-lactamine
Ceftazidime (CAZ)
30
Bêta-lactamine
Cloxacillin (CX)
1
Bêta-lactamine
Amikacine (AK)
30
Aminoglycoside
Gentamicine (GM)
10
Aminoglycoside
Bacitracine (B)
10
Polypeptides
Tétracycline (TE)
30
Cycline
Triméthoprime (TMP)
5
Diaminopyrimidines
II.8 Essaie d’élimination du chrome par des souches résistantes
aux métaux lourds (Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus
aureus, Klebsiella pneumoniae )
Trois souches bactériennes prometteuses ont été sélectionnées à savoir : Pseudomonas aeruginosa
(Hr1), Staphylococcus aureus (Hr st), Klebsiella pneumoniae (Hz(4)) pour la suite de l’étude. On
a exploré l’impact de trois paramètres clés sur leur capacité d’élimination du Chrome VI :
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Matériel & Méthodes
l’antibiogramme de la Société Française de Microbiologie (CA-SFM, 2023).
II.7.1 Technique de l’antibiogramme
Une suspension bactérienne de la souche à tester (10
8 UFC/ml) a été préparée à partir d’une culture
jeune de 24h incubée à 37°C. Cette suspension a été ensuite ensemencée de manière uniforme sur
la surface d’une gélose Mueller-Hinton (MH) à l’aide d’un écouvillon stérile. Les disques d’antibiotiques ont été déposés sur la surface de cette gélose à l’aide d’une pince stérile. Les boîtes
ont ensuite été laissées à température ambiante pendant 15 minutes pour permettre la diffusion des
antibiotiques dans le milieu gélosé avant d’être incubées à 37°C pendant 18 à 24 heures.
Lecture Conformément aux recommandations du Comité de l’Antibiogramme de la Société Française de Microbiologie (CA-SFM, 2023), les diamètres des zones d’inhibition formées autour des
disques d’antibiotiques ont été mesurés en millimètres à l’aide d’un pied à coulisse. Ces valeurs
ont ensuite été comparées aux diamètres critiques fournis par le CA-SFM afin de déterminer la
sensibilité de la souche bactérienne testée aux différents antibiotiques.
le TABLEAU II.3 présente les différents antibiotiques qui ont été sélectionnés pour évaluer la sensibilité des espèces bactériennes étudiées.
TABLEAU II.3 – Les différents antibiotiques testés
Antibiotique
Charge(μg) Famille d’antibiotique
Ampicilline (AM)
10
Bêta-lactamine
Ceftazidime (CAZ)
30
Bêta-lactamine
Cloxacillin (CX)
1
Bêta-lactamine
Amikacine (AK)
30
Aminoglycoside
Gentamicine (GM)
10
Aminoglycoside
Bacitracine (B)
10
Polypeptides
Tétracycline (TE)
30
Cycline
Triméthoprime (TMP)
5
Diaminopyrimidines
II.8 Essaie d’élimination du chrome par des souches résistantes
aux métaux lourds (Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus
aureus, Klebsiella pneumoniae )
Trois souches bactériennes prometteuses ont été sélectionnées à savoir : Pseudomonas aeruginosa
(Hr1), Staphylococcus aureus (Hr st), Klebsiella pneumoniae (Hz(4)) pour la suite de l’étude. On
a exploré l’impact de trois paramètres clés sur leur capacité d’élimination du Chrome VI :
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