CHAPITRE II
Matériel & Méthodes
II.4 Évaluation de la résistance bactérienne aux métaux lourds
L’évaluation de la résistance des bactéries aux métaux lourds à été effectuée pour six métaux lourds
sélectionnés selon leurs utilisations, disponibilités, toxicité et importance. Les métaux concernés
sont (CuSo 4 ), (ZnSo 4 ), (CdCl 2 ), (HgCl 2 ), (K 2 Cr 2 O 7 ) et (PbNO 3 ) Voir TABLEAU II.2 avec des
concentrations finales respectives de 400 µg/ml, 400 µg/ml, 200 µg/ml, 50 µg/ml, 400 µg/ml et
3200 µg/ml. La préparation des boites à été réalisée selon la méthode de dilution en milieu gélosé
(mueller-hinton) (Touahir et al., 2023 ).
TABLEAU II.2 – Formes d’oxydation des métaux utilisés
Sel métallique Forme d’oxydation du métal
CuSo 4
Cu
2+
ZnSo 4
ZN
2+
CdCl 2
Cd
2+
HgCl
Hg
2+
PbNO 3
Pb
2+
K 2 Cr 2 O 7
Cr
6+
0,1ml des échantillons ou des dilutions ont été ensemencés en surface des boites gélosé avec ou
sans métaux lourds. Les boites ont été incubées à 37 C° pendant 24 à 48 h, et par la suite les bactéries qui ont poussées sur chaque boite ont été dénombrées.
%resistance aux metaux lourds =
nombre de bacteries sur milieu contenant metal
nombre de bacteries sur milieu sans metal
∗ 100
(II.1)
II.5 Purification et conservation des souches résistantes aux métaux lourds
Les bactéries présentant une résistance aux métaux, démontrés par leur croissance sur les milieux
ensemencés avec les métaux, ont été repiquées à plusieurs reprises sur des milieux contenant les
mêmes métaux. Le repiquage se poursuit jusqu’à l’obtention d’une culture homogène où toutes les
colonies sont identiques entre elles. Ensuite, elles ont été conservées dans des tubes de conservation.
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