CHAPITRE II
Matériel & Méthodes
II.3 Évaluation de la qualité bactériologique des échantillons
d’eau
L’évaluation de la qualité bactériologique des échantillons provenant des embouchures d’Oued El
Harrach et d’Oued El Hamiz a été effectuée en utilisant la méthode de filtration sur membrane (Rodier et al., 2009), pour la détermination et le dénombrement de la flore mésophile totale ainsi que
les germes de contamination fécale (coliformes totaux, coliformes fécaux, streptocoques fécaux).
Des dilutions de 10 en 10 ont été réalisées pour chaque échantillon. voir Fig.II.3.
II.3.1 Mode opératoire
— Stérilisation du dispositif de filtration
FigII.2.
— Installation du dispositif.
— Placer le filtre stérile en ester de cellulose
(0.45μmde porosité) sur la grille.
— Filtrer un volume (100ml) d’échantillon
ou de dilution.
— Placer le filtre sur le milieu de culture
adapté à chaque bactérie recherchée.
— Incuber les boîtes à la température appropriée
FIG. II.2 – Système de filtration sur membrane.
Le résultat sera exprimé en Unité Formant Colonie par 100 ml d’eau analysée (UFC/100ml) (Beleneva, 2011)
II.3.2 Dénombrement de la flore mésophile aérobie totale
La flore aérobie mésophile est un indicateur technique qui tente de représenter la charge microbienne totale, les membranes de filtration sont placer sur gélose PCA, et les boites sont incubées à
37 C° pendant 24 à 48 h (Rodier et al., 2009).
II.3.3 Dénombrement des coliformes totaux
Les coliformes totaux correspondent à des bacilles à Gram négatif, non sporulé, oxydase négatif,
aérobie et anaérobie facultatifs, capables de se multiplier en présence de sels biliaires et de fermenter
le lactose avec production d’acide et de gaz en 24-48h à 35-37°C.
Pour procéder au dénombrement, la membrane de filtration est simplement déposée sur une boite
de Petri contenant la gélose lactosée au TTC et au tergitol 7, tout en évitant les bulles d’air, puis les
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Matériel & Méthodes
II.3 Évaluation de la qualité bactériologique des échantillons
d’eau
L’évaluation de la qualité bactériologique des échantillons provenant des embouchures d’Oued El
Harrach et d’Oued El Hamiz a été effectuée en utilisant la méthode de filtration sur membrane (Rodier et al., 2009), pour la détermination et le dénombrement de la flore mésophile totale ainsi que
les germes de contamination fécale (coliformes totaux, coliformes fécaux, streptocoques fécaux).
Des dilutions de 10 en 10 ont été réalisées pour chaque échantillon. voir Fig.II.3.
II.3.1 Mode opératoire
— Stérilisation du dispositif de filtration
FigII.2.
— Installation du dispositif.
— Placer le filtre stérile en ester de cellulose
(0.45μmde porosité) sur la grille.
— Filtrer un volume (100ml) d’échantillon
ou de dilution.
— Placer le filtre sur le milieu de culture
adapté à chaque bactérie recherchée.
— Incuber les boîtes à la température appropriée
FIG. II.2 – Système de filtration sur membrane.
Le résultat sera exprimé en Unité Formant Colonie par 100 ml d’eau analysée (UFC/100ml) (Beleneva, 2011)
II.3.2 Dénombrement de la flore mésophile aérobie totale
La flore aérobie mésophile est un indicateur technique qui tente de représenter la charge microbienne totale, les membranes de filtration sont placer sur gélose PCA, et les boites sont incubées à
37 C° pendant 24 à 48 h (Rodier et al., 2009).
II.3.3 Dénombrement des coliformes totaux
Les coliformes totaux correspondent à des bacilles à Gram négatif, non sporulé, oxydase négatif,
aérobie et anaérobie facultatifs, capables de se multiplier en présence de sels biliaires et de fermenter
le lactose avec production d’acide et de gaz en 24-48h à 35-37°C.
Pour procéder au dénombrement, la membrane de filtration est simplement déposée sur une boite
de Petri contenant la gélose lactosée au TTC et au tergitol 7, tout en évitant les bulles d’air, puis les
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