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MATERIELS ET METHODES
III.2.5 Technique analytique
III.2.5.1 Dosage des sels nutritifs
L’analyse des sels nutritifs est faite par la méthode de colorimétrie à flux continu sur chaine
automatisée SKALAR (Auto-analyser San Plus) (troisième génération), selon les protocoles
décrits par le constructeur SKALAR (SKALAR, 1996).
La méthode utilisée pour le dosage des sels nutritifs est basée sur une réaction de coloration.
En effet, ces sels réagissent dans certaines conditions (température, pH, présence de
catalyseurs,…) avec des réactifs spécifiques pour donner une coloration absorbant de l’énergie
lumineuse qui dépend de l’intensité de la coloration, de même, ce dernier est d’autant plus
important que la solution est concentrée en sel dosé.
La quantité de lumière absorbée par la solution, appelée absorbance (A) ou densité optique
(D.O), obéit à la loi de Beer-Lambert (Eq.6) qui est exprimée par la relation suivante :
A = D.O. = log (I0/I) = ε.l.C
Avec :
I0 et I : les intensités lumineuses incidente et émergente du milieu absorbant
ε : le coefficient d’extinction molaire variant en fonction de la température et la longueur d’onde
l : la longueur du milieu traversé exprimé (cm)
C : concentration de la solution absorbante exprimée (mole/l)
A : absorbance de la solution
D.O : densité optique de la solution
Dosage des nitrites
Les nitrites (NO2-) forment un diazoïque par action avec la sulfanilamide en milieu acide pH<2.
Ce composé formera ensuite en présence de N-naphtylethylénediamine un composé azoïque de
couleur rose absorbant la lumière à 540 nm (Bachouche S 2010).
Dosage des nitrates
La méthode est basée sur la réduction des nitrates (NO3-) en nitrites (NO2-) par le passage de
l’échantillon à travers une colonne réductrice de cadmium traité au cuivre (Wood et al., 1967).
Les nitrites (en réalité NO2- + NO3- réduits) seront ensuite dosés par colorimétrie selon la
méthode précédemment décrite. Il suffira alors d’en déduire la concentratio n des nitrites
déterminés directement (sans passage de l’échantillon sur la colonne réductrice) pour trouver
les concentrations des nitrates (Rodier et al., 1996).
MATERIELS ET METHODES
III.2.5 Technique analytique
III.2.5.1 Dosage des sels nutritifs
L’analyse des sels nutritifs est faite par la méthode de colorimétrie à flux continu sur chaine
automatisée SKALAR (Auto-analyser San Plus) (troisième génération), selon les protocoles
décrits par le constructeur SKALAR (SKALAR, 1996).
La méthode utilisée pour le dosage des sels nutritifs est basée sur une réaction de coloration.
En effet, ces sels réagissent dans certaines conditions (température, pH, présence de
catalyseurs,…) avec des réactifs spécifiques pour donner une coloration absorbant de l’énergie
lumineuse qui dépend de l’intensité de la coloration, de même, ce dernier est d’autant plus
important que la solution est concentrée en sel dosé.
La quantité de lumière absorbée par la solution, appelée absorbance (A) ou densité optique
(D.O), obéit à la loi de Beer-Lambert (Eq.6) qui est exprimée par la relation suivante :
A = D.O. = log (I0/I) = ε.l.C
Avec :
I0 et I : les intensités lumineuses incidente et émergente du milieu absorbant
ε : le coefficient d’extinction molaire variant en fonction de la température et la longueur d’onde
l : la longueur du milieu traversé exprimé (cm)
C : concentration de la solution absorbante exprimée (mole/l)
A : absorbance de la solution
D.O : densité optique de la solution
Dosage des nitrites
Les nitrites (NO2-) forment un diazoïque par action avec la sulfanilamide en milieu acide pH<2.
Ce composé formera ensuite en présence de N-naphtylethylénediamine un composé azoïque de
couleur rose absorbant la lumière à 540 nm (Bachouche S 2010).
Dosage des nitrates
La méthode est basée sur la réduction des nitrates (NO3-) en nitrites (NO2-) par le passage de
l’échantillon à travers une colonne réductrice de cadmium traité au cuivre (Wood et al., 1967).
Les nitrites (en réalité NO2- + NO3- réduits) seront ensuite dosés par colorimétrie selon la
méthode précédemment décrite. Il suffira alors d’en déduire la concentratio n des nitrites
déterminés directement (sans passage de l’échantillon sur la colonne réductrice) pour trouver
les concentrations des nitrates (Rodier et al., 1996).