CHAPITRE II : MATERIEL ET METHODES
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II.2.3.1. Préparation et étalonnage de la solution du bleu de méthylène
Nous avons préparé une solution mère de concentration déterminée, à partir de laquelle nous
avons effectué une série de dilutions successives afin d'obtenir des solutions filles présentant des
concentrations précises.
Préparation de la solution mère
Pour la préparation de la solution mère, on dissout une quantité de poudre de bleu de méthylène
dans l’eau distillée. Une agitation de mélange était réalisée à l'aide d'un agitateur magnétique
pour assurer une homogénéisation optimale. Ensuite, le mélange a été recouvert d'un papier
d'aluminium et conservé à l'abri de la lumière.
Préparation des solutions filles
Le tableau 13 représente les concentrations et les volumes prélevés pour préparer les solutions
filles à partir de la solution mère par dilution.
Tableau 13: Concentrations et volumes prélevés pour la préparation des solutions filles.
Solutions
Mère Fille
1
Fille
2
Fille
3
Fille
4
Fille
5
Fille
6
Volume (ml)
1000 25
25
25
25
25
25
Concentration [C] (mg/l)
50
1
2
3
4
5
10
Volume prélevé (ml)
/
0.5
1
1.5
2
2.5
5
L’absorbance des solutions étalons est mesurée à une longueur d’onde spécifique de 665 nm
(pour le bleu de méthylène (ʎmax =665 nm) à l’aide d’un spectrophotomètre UV-Visible par
l’utilisation des cuves de 1 cm de diamètre. Les résultats sont alors utilisés pour tracer une
courbe d’étalonnage A = f (Ce), où Ce représente la concentration effective des solutions.
II.2.3.2. Spectrophotométrie UV-visible
La spectrophotométrie UV-visible, est un type d’analyse chimique développé pour la détection
des éléments chimiques qui absorbent des rayonnements électromagnétiques situés dans le
domaine spectral ultraviolet-visibles. C’est une méthode analytique à la fois quantitative et
qualitative qui consiste à mesurer l’absorbance ou densité optique d’une substance chimique.
Elle est très recommandée pour le dosage des colorants. Cette méthode est employée pour
déterminer la quantité du bleu du méthylène en passant par la détermination de l’absorbance. Il
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II.2.3.1. Préparation et étalonnage de la solution du bleu de méthylène
Nous avons préparé une solution mère de concentration déterminée, à partir de laquelle nous
avons effectué une série de dilutions successives afin d'obtenir des solutions filles présentant des
concentrations précises.
Préparation de la solution mère
Pour la préparation de la solution mère, on dissout une quantité de poudre de bleu de méthylène
dans l’eau distillée. Une agitation de mélange était réalisée à l'aide d'un agitateur magnétique
pour assurer une homogénéisation optimale. Ensuite, le mélange a été recouvert d'un papier
d'aluminium et conservé à l'abri de la lumière.
Préparation des solutions filles
Le tableau 13 représente les concentrations et les volumes prélevés pour préparer les solutions
filles à partir de la solution mère par dilution.
Tableau 13: Concentrations et volumes prélevés pour la préparation des solutions filles.
Solutions
Mère Fille
1
Fille
2
Fille
3
Fille
4
Fille
5
Fille
6
Volume (ml)
1000 25
25
25
25
25
25
Concentration [C] (mg/l)
50
1
2
3
4
5
10
Volume prélevé (ml)
/
0.5
1
1.5
2
2.5
5
L’absorbance des solutions étalons est mesurée à une longueur d’onde spécifique de 665 nm
(pour le bleu de méthylène (ʎmax =665 nm) à l’aide d’un spectrophotomètre UV-Visible par
l’utilisation des cuves de 1 cm de diamètre. Les résultats sont alors utilisés pour tracer une
courbe d’étalonnage A = f (Ce), où Ce représente la concentration effective des solutions.
II.2.3.2. Spectrophotométrie UV-visible
La spectrophotométrie UV-visible, est un type d’analyse chimique développé pour la détection
des éléments chimiques qui absorbent des rayonnements électromagnétiques situés dans le
domaine spectral ultraviolet-visibles. C’est une méthode analytique à la fois quantitative et
qualitative qui consiste à mesurer l’absorbance ou densité optique d’une substance chimique.
Elle est très recommandée pour le dosage des colorants. Cette méthode est employée pour
déterminer la quantité du bleu du méthylène en passant par la détermination de l’absorbance. Il