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ANNEXE I : Dénombrement cellulaire
La concentration en nombre de cellules présente dans la suspension micro-algale est
déterminée au microscope optique (ojectif 40) par comptage sur hématimètre de type Malassez.
La cellule de Malassez est une lame spéciale en verre développée pour le comptage de diverses
cellules animales et végétales. Elle est munie de deux chambres de comptage sur la surface
supérieure sur lesquelles est placée une lamelle de verre spéciale (plaque couvre-objet) délimitant
une profondeur de 0.2 mm. Chaque chambre de comptage est gravée horizontalement et
verticalement. Cette gravure précise trace un quadrillage dont on connait les dimensions. Chaque
chambre de comptage est donc un quadrillage composé de 25 grands rectangles dont les
dimensions sont connues (0.25 de longueur et 0.25 mm de largeur), chacun est subdivisé en 20
petits carrés de 0.05 mm de côté.
Remplissage de la cellule :
1. Prélever un échantillon de culture.
2. Homogénéiser l’échantillon.
3. Fixer avec du lugol (2 gouttes dans 1ml) ou de l’eau de javel diluée
4. Humidifier les parties extérieures à la lamelle.
5. Déposer la lamelle sur la cellule de Malassez et faire adhérer la lamelle à la lame en
faisant glisser plusieurs fois la lamelle sur la lame.
6. Déposer l’échantillon sur le bord de la lame à l’aide d’une pipette pasteur, le liquide
remplit alors la cellule par capillarité.
7. Mettre la lame au microscope.
Dénombrement :
1. Faire une première mise au point à l’objectif x40.
2. Passez au grossissement x100 et faire la mise au point. Le quadrillage doit être bien
visible.
3. Compter le nombre de cellules pour 5 cases.
ANNEXE I : Dénombrement cellulaire
La concentration en nombre de cellules présente dans la suspension micro-algale est
déterminée au microscope optique (ojectif 40) par comptage sur hématimètre de type Malassez.
La cellule de Malassez est une lame spéciale en verre développée pour le comptage de diverses
cellules animales et végétales. Elle est munie de deux chambres de comptage sur la surface
supérieure sur lesquelles est placée une lamelle de verre spéciale (plaque couvre-objet) délimitant
une profondeur de 0.2 mm. Chaque chambre de comptage est gravée horizontalement et
verticalement. Cette gravure précise trace un quadrillage dont on connait les dimensions. Chaque
chambre de comptage est donc un quadrillage composé de 25 grands rectangles dont les
dimensions sont connues (0.25 de longueur et 0.25 mm de largeur), chacun est subdivisé en 20
petits carrés de 0.05 mm de côté.
Remplissage de la cellule :
1. Prélever un échantillon de culture.
2. Homogénéiser l’échantillon.
3. Fixer avec du lugol (2 gouttes dans 1ml) ou de l’eau de javel diluée
4. Humidifier les parties extérieures à la lamelle.
5. Déposer la lamelle sur la cellule de Malassez et faire adhérer la lamelle à la lame en
faisant glisser plusieurs fois la lamelle sur la lame.
6. Déposer l’échantillon sur le bord de la lame à l’aide d’une pipette pasteur, le liquide
remplit alors la cellule par capillarité.
7. Mettre la lame au microscope.
Dénombrement :
1. Faire une première mise au point à l’objectif x40.
2. Passez au grossissement x100 et faire la mise au point. Le quadrillage doit être bien
visible.
3. Compter le nombre de cellules pour 5 cases.