Chapitre 2
Matériel et méthodes
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Figure 15. Protocole de coloration des cellules à tanins (selon Gutmann (1995), modifié).
2.3.2.3. Dénombrement des cellules à tanins
Pour le dénombrement des cellules à tanins nous avons suivi le protocole de Boumaza et al.
(2022), qui consiste à comptabiliser le nombre de cellules à tanins présentes au niveau de
l’ensemble de la surface de la coupe transversale, effectuée dans la région apicale des limbes.
Le comptage des cellules à tanins est effectué sous microscope optique au grossissement
40X. Ce dernier est préalablement étalonné en utilisant une lame micrométrique et un
oculaire gradué pour chaque grossissement utilisé. L’utilisation de l’oculaire gradué nous a
également permis de mesurer l’épaisseur de chaque coupe. Cette dernière mesure multipliée
par la larguer des feuilles, déterminée préalablement lors de l’étude de la biométrie foliaire,
permet de calculer la surface des coupes et donc de rapporter le nombre de cellules à tanins
à la surface, ce que nous appellerons densité des cellules à tanins dans ce manuscrit.
Traitement avec de l'hypochlorite de sodium (12%) pendant 1 à 2 min.
Rinçage abondant avec de l'eau distillée.
Coloration au bleu de toluidine (0,05%) pendant 5 à 10 min.
Rinçage abondant avec de l'eau distillée.
Traitement avec du Lugol dilué avec l’eau distillée 1 :3 (v/v) pendant 1min.
Rinçage rapide avec de l'eau distillée.