Chapitre II : Matériel et méthodes
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1.2.2 Test de la catalase
Certaines bactéries ont la capacité de décomposer le peroxyde d’hydrogène ((H2O2) en présence
de l’enzyme catalase qui libère l’oxygène gazeux (François Denis et al, 2007)
Selon la réaction suivante :
2H2O2
O2+2H2O
Mode opératoire :
• Sur une lame, déposer une goutte de H2O2
• Étaler une colonie sur la lame à l’aide d’une anse de platine.
Le dégagement des bulles d’air signifie une catalase positive contrairement à une catalase
négative.
1.3 Production de biofilm
Les biofilms bactériens sont des amas structurés de cellules bactériennes enrobés d'une
matrice polymérique et attachés à une surface. Le biofilm protège les bactéries et leur
permet de survivre dans des conditions environnementales hostiles. Les bactéries
produisant du biofilm sont beaucoup plus résistantes aux antibiotiques. (Yannick D.N.
Tremblay et al 2012)
Mode opératoire :
- Mettre quelques colonies bien isolées dans l’eau physiologique
- Lire la densité optique à une longueur d’onde de 540 nm.
- Déposer les bactéries dans une microplaque de titration et incubé pendant 6h à 37°C.
- Après incubation, ajouter du cristal violet à 1% dans chaque puits.
- Laisser reposer 15min à température ambiante
- On effectue 3 lavages au PBS, puis avec de l’éthyle d’alcool.
- Mettre le contenu de chaque puits dans un tube stérile qui contient de l’alcool.
- Après agitation du tube, on lit la DO à 540nm (Maldonado et al, 2007).
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1.2.2 Test de la catalase
Certaines bactéries ont la capacité de décomposer le peroxyde d’hydrogène ((H2O2) en présence
de l’enzyme catalase qui libère l’oxygène gazeux (François Denis et al, 2007)
Selon la réaction suivante :
2H2O2
O2+2H2O
Mode opératoire :
• Sur une lame, déposer une goutte de H2O2
• Étaler une colonie sur la lame à l’aide d’une anse de platine.
Le dégagement des bulles d’air signifie une catalase positive contrairement à une catalase
négative.
1.3 Production de biofilm
Les biofilms bactériens sont des amas structurés de cellules bactériennes enrobés d'une
matrice polymérique et attachés à une surface. Le biofilm protège les bactéries et leur
permet de survivre dans des conditions environnementales hostiles. Les bactéries
produisant du biofilm sont beaucoup plus résistantes aux antibiotiques. (Yannick D.N.
Tremblay et al 2012)
Mode opératoire :
- Mettre quelques colonies bien isolées dans l’eau physiologique
- Lire la densité optique à une longueur d’onde de 540 nm.
- Déposer les bactéries dans une microplaque de titration et incubé pendant 6h à 37°C.
- Après incubation, ajouter du cristal violet à 1% dans chaque puits.
- Laisser reposer 15min à température ambiante
- On effectue 3 lavages au PBS, puis avec de l’éthyle d’alcool.
- Mettre le contenu de chaque puits dans un tube stérile qui contient de l’alcool.
- Après agitation du tube, on lit la DO à 540nm (Maldonado et al, 2007).